Note ABES Study of cell host factors involved in Hepatitis C virus tropism Etude des facteurs cellulaires de l'hôte impliqués dans le tropisme du virus de l'hépatite C Intéraction virus-hôte Tropisme du HCV Spécificité d’espèce du HCV Entrée du HCV Replication du HCV Assemblage du HCV et modèle murin du HCV Hepatitis C virus infection Virus-host interaction HCV tropism HCV species specificity HCV entry HCV replication HCV assembly and HCV mouse model 579.2 616.91 572.8 Relations hôte-virus Virus de l'hépatite C ARN -- Réplication Murins Le virus de l’hépatite C (HCV) est un problème majeur de santé publique. Le développement de nouveaux traitements pour lutter contre le HCV a été ralenti par l’absence de modèles d’études in vitro et in vivo convenables. Le but de mon travail de thèse a été, dans un premier temps, de caractériser les facteurs déterminant le tropisme hépatique du HCV. En exprimant des facteurs clés dans une lignée cellulaire humaine non-hépatocytaire, nous avons reconstitué in fine l’ensemble du cycle viral dans ces cellules. L’entrée du virus dans la cellule hôte fait intervenir différents récepteurs d’entrée dont CD81, occludin (OCLN), claudin-1 (CLDN1) et scavenger receptor class B type I (SR-BI). L’expression de ces quatre récepteurs sur cette lignée la rend hautement permissive à l’entrée du virus, mais ne permet pas de rétablir la réplication du virus. L’expression du micro-ARN 122, un micro-RNA important pour l’infection du HCV, dans les cellules exprimant les quatre récepteurs, restaure une forte réplication de l’ARN viral mais ne permet pas de détecter une production de particules infectieuses. L’expression de l’apolipoprotein E (apoE), jouant un rôle primordial dans l’assemblage et la sécrétion, rétablis cette dernière étape du cycle viral du HCV dans la lignée cellulaire humaine non-hépatocytaire. Dans un second temps, j’ai utilisé la stratégie, précédemment établie, pour étudier la spécificité d’espèce de l’infection du HCV dans plusieurs lignées hépatocytaires murines. Nous avons pu rendre ces cellules permissives à l’entrée du HCV et pu détecter une très faible réplication. L’ensemble de mes travaux apportent de nouvelles informations sur la compréhension des facteurs clés nécessaire au cycle viral du HCV dans des cellules murines et humaines. Hepatitis C virus (HCV) is a global health burden. The development of new therapeutics to treat HCV infection has been hampered by the lack of convenient in vitro and in vivo model systems. The goal of my PhD work was, in a first time, to characterize the factors determining the hepatotropism of HCV. By expressing key factors within a non-hepatic cell line, we reconstituted in fine the full HCV life cycle in those cells. Virus entry into the host cell requires different entry factors which are CD81, occludin (OCLN), claudin-1 (CLDN1) and the scavenger receptor class B type I (SR-BI). The expression of these four factors in this cell line renders it highly permissive to viral entry, but does not allow restoring replication of the virus. The expression of miR-122, a micro-RNA important for HCV infection, into the cell lines expressing the four HCV entry factors restore a strong replication of the HCV RNA but does not allow detecting infectious viral particle production. Further expression of the apolipoprotein E (apoE), which plays a critical role in the assembly and release process, restore the last step of the HCV life cycle in a non-hepatic cell line. In a second part of my PhD, I have used the previously developed strategy to study the species specificity of HCV infection using different mouse hepatoma cell lines. We have been able to render these cell lines permissive to HCV entry and have been able to detect a slight replication. Altogether, my results bring new information on the understanding of key factors important for HCV life cycle in mouse and human cells. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 2727128 Université de Strasbourg Strasbourg 2013-12-31 https://theses.hal.science/tel-00804227 application/pdf 2604589 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2012/Da Costa_Daniel_2012_ED414.pdf http://www.theses.fr/2012STRAJ071/abes https://theses.hal.science/tel-00804227 https://theses.hal.science/tel-00804227 https://theses.hal.science/tel-00804227 https://theses.hal.science/tel-00804227 https://theses.hal.science/tel-00804227 Da Costa Daniel 1986-08-22 FR 168192721 20918462 https://theses.fr/2012STRAJ071 2012STRAJ071 https://doi.org/10.70675/bed82047z2173z4d38z9528zca0bdb298aed 2012-09-18 Virologie : aspects moléculaires et médicaux Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Baumert Thomas MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 143387898 Patel Arvind MADS_PRESIDENT_DU_JURY Prevost Gilles MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 Cocquerel Laurence MADS_RAPPORTEUR_1 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 VS 156502844 Institute for Translational Medicine and Liver Disease (Strasbourg ; 201X-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 UMR_S748 157770885 93772 ddc:570 ddc:610 Baumert Thomas Patel Arvind Prevost Gilles Cocquerel Laurence École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Interactions virus-hôte et maladies hépatiques (Strasbourg) PDF 2727128