Fluorescence picoseconde de complexes bio-moléculaires hors équilibre dans un écoulement microfluidique
Picosecond fluorescence of out-of-equilibrium biomolecular complexes in microfluidic devices
Physique
Biophysique
Optique
Optique non linéaire
Spectroscopie
Fluorescence
Fluorescence résolue en temps
Microfluidique
Biomolécules
Hétérogénéité structurale
Dynamique structurale
Caméra à balayage de fente
Physics
Biophysics
Optics
Non linear optics
Spectroscopy
Fluorescence
Time resolved fluorescence
Microfluidics
Biomolecules
Structural heterogeneity
Structural dynamics
Streak camera
621.36
Microfluidique
Fluorescence
Optique non linéaire
Génomique
Ce travail de thèse a démontré la possibilité de mesurer la relaxation d’un complexe biomoléculaire ainsi que son hétérogénéité structurale, en associant la microfluidique et la fluorescence résolue en temps (FRT). Je présente de quelle façon la FRT permet d’obtenir une information sur la structure d’une molécule et comment on la mesure, notamment grâce à une caméra à balayage de fente. J’introduis ensuite la microfluidique de gouttes, permettant de mélanger deux réactifs en quelques millisecondes et de suivre la relaxation du complexe au cours de la propagation des micro-réacteurs. Puis, la mesure d’une cinétique avec un couple de molécules modèle démontre la preuve de principe, faisant l’objet d’un article soumis. Enfin la mesure de FRT par comptage de photons uniques dans des gouttes uniques est décrite. Elle ouvre une perspective d’application pour le criblage à haut débit : un brevet a été déposé.
This thesis has proven the feasibility of measuring the relaxation of a biomolecular complex as well as its structural heterogeneity, by associating microfluidics and time resolved fluorescence (TRF). I present in which way TRF allows for probing the structure of a molecule and how it is measured, in particular by using a streak camera. I then introduce droplet microfluidics, which enables to mix two reagents in a few milliseconds and to follow the relaxation of the complex, along propagation of the micro-reactors. Next, the measurement of a kinetics with test molecules validates the proof of concept, reported in a submitted article. Finally, the measurement of TRF by single photon counting in single droplets is described. It opens a perspective for an application in high-throughput screening: a patent has been registered.
Electronic Thesis or Dissertation
Text
fr
PDF
7062073
Université de Strasbourg
Strasbourg
2014-12-31
https://theses.hal.science/tel-01077756
application/pdf
3117130
https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2013/maillot_sacha_2013_ED182.pdf
http://www.theses.fr/2013STRAE041/abes
https://theses.hal.science/tel-01077756
https://theses.hal.science/tel-01077756
Maillot
Sacha
1987-07-30
FR
181054450
https://theses.fr/2013STRAE041
2013STRAE041
https://doi.org/10.70675/1d2c55b5zc463z4d61zb0b4z260b5c5411e2
2013-12-17
Physique
Strasbourg
131056549
Doctorat
Docteur es
non
oui
Léonard
Jérémie
089269233
Haiech
Jacques
Lecomte
Sophie
Pansu
Robert
École doctorale Physique et chimie-physique (Strasbourg ; 1994-....)
156500019
Institut de physique et chimie des matériaux (Strasbourg)
93794
151842973
ddc:620
PDF
7062073