Note ABES Production de terpènes fonctionnalisés par les cytochromes P450 de plantes recombinants Production of functionalized terpenes by recombinant plant cytochromes P450 Cytochrome P450 Terpènes Bioconversion Arômes Parfums Cytochrome P450 Terpenes Bioconversion Scent Aroma 572.8 Cytochrome P450 Terpènes biosynthèse Mutation induite chez les plantes Recombinaison génétique Notre objectif était d’identifier des cytochromes P450 capables d’oxygéner des mono et sesquiterpènes, pour produire des molécules aux propriétés organoleptiques intéressantes labellisés « naturelles » par l’industrie des arômes et du parfum.Nous avons identifié 7 couples P450-substrat catalysant une conversion in vitro supérieure ≥ 45 % et/ou formant un produit attendu. Les quantités de produit obtenu par bioconversion dans la levure restent insuffisantes pour un procédé industriel. Les facteurs limitants ont été identifiés dans le cas du valencène comme : 1) la toxicité induite par les produits, 2) l’accumulation du β-nootkatol dans les membranes, 3) l’inhibition de l’enzyme par les produits réactionnels. Trois cytochromes P450 d’Arabidopsis thaliana impliqués dans le métabolisme indolique oxydent activement le limonène. Ils s’expriment dans les inflorescences et constituent le premier exemple de P450s suceptibles de participer à deux voies métaboliques indépendantes chez les plantes. Our aim was to identify cytochromes P450 catalyzing hydroxylation of mono-and sesquiterpenes to produce functionalized "natural" compounds with interesting organoleptic properties for the flavor and fragrance industry. We identified 7 P450-substrate pairs showing . 45 % in vitro conversion and/or forming an expected product. The amounts of products resulting from yeast bioconversion were however too low for implementation of an industrial process. Factors limiting the nootkatone production from the P450-dependent bioconversion of valencene were identified : 1) toxicity for yeast of the ƒÀ-nootkatol and nootkatone products, 2) ƒÀ-nootkatol accumulation in endomembranes, 3) products inhibition of valencene hydroxylation. Three previously characterized P450s from Arabidopsis thaliana in indolic metabolism were shown to actively oxidize limonene. They are expressed in inflorescences and may provide the first demonstrated case of multifunctional P450s involved in independent plant pathways. Electronic Thesis or Dissertation Text fr PDF 11299956 Université de Strasbourg Strasbourg 2013-12-31 https://theses.hal.science/tel-01124093 application/pdf 7364804 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2013/Gavira_Carole_2013_ED414.pdf http://www.theses.fr/2013STRAJ009/abes https://theses.hal.science/tel-01124093 https://theses.hal.science/tel-01124093 https://theses.hal.science/tel-01124093 https://theses.hal.science/tel-01124093 Gavira Carole 1984-07-09 FR 169441962 20919120 https://theses.fr/2013STRAJ009 2013STRAJ009 https://doi.org/10.70675/26751e5dz73b4z43dbz93b7zcc0d60125fef 2013-02-26 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Werck-Reichhart Danièle MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 060823755 Bach Thomas MADS_PRESIDENT_DU_JURY Feyereisen René MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 Bourgaud Frédéric MADS_RAPPORTEUR_1 Tissier Alain MADS_RAPPORTEUR_2 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 VS 156502844 Institut de biologie moléculaire des plantes (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 UPR 2357 156775727 444 ddc:570 Reichhart Danièle Bach Thomas Feyereisen René Bourgaud Frédéric Tissier Alain École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg) Institut de biologie moléculaire des plantes (Strasbourg) PDF 11299956 confidentialité 2013-02-26 2015-03-01 confidentialité 2013-02-26 2015-03-01 restriction 2013-02-26 2015-03-01 confidentialité 2013-02-26 2015-03-01 confidentialité 2013-02-26 2015-03-01