Note ABES Induction par Vpr de la dégradation de la protéine CTIP2 via la voie du protéasome dans les cellules microgliales Induction of proteasome-mediated degradation of CTIP2 by HIV-1 Vpr in microglial cells VIH-1 Vpr CTIP2 DCAF1et Ubiquitination HIV-1 Vpr CTIP2 DCAF1 and Ubiquitination 572.8 616.97 VIH (virus) Protéines virales Transcription génétique Ubiquitine Microglie Dissertations universitaires Le détournement de la machinerie cellulaire basé sur la dégradation par la voie du protéasome est une stratégie fréquemment retrouvée chez les virus afin d’optimiser leur réplication. Ainsi, le VIH-1 a développé toute une série de contremesures via ses protéines accessoires, vif et vpu notamment, afin de cibler les facteurs de restriction vers la voie du protéasome. La protéine accessoire Vpr est également associée à un complexe Cul4 E3 ubiquitin ligase mais est toujoursorphelin de sa cible. Nos travaux ont montré que la protéine CTIP2 est un acteur majeur impliqué dans la restriction de la réplication du VIH-1. Nous proposons de défendre la thèse selon laquelle la protéine CTIP2 est dégradée par la voie du protéasome en présence de la protéine vpr. Nous avons ainsi montré que l’expression de la protéine CTIP2 est plus forte en absence qu’en présence de la protéine vpr. Des expériences utilisant des inhibiteurs de la voie du protéasome sont en faveur d’une régulation de type post traductionnel. Par immunoprécipitation, nous avons montré que CTIP2 fait partie d’un complexe comprenant DDB1 et DCAF1 en présence et en absence de Vpr. Sa dégradation est prévenue en présence du mutant vpr (Q65R) qui n’interagit plus avec DCAF, et en présence d’un Knock Down de DCAF1par ailleurs, DCAF1 est associé avec CTIP2 inclus dans le complexe impliqué dans l’établissement de la latence du VIH-1 comprenant notamment HDAC1. Enfin, les protéines CTIP2, Vpr et DCAF colocalisent dans les noyaux des cellules microgliales. Nos résultats suggèrent fortement que la protéine Vpr favorise la dégradation du facteur CTIP2, qui est décrit comme un facteur restreignant l’infection par le VIH-1 dans les cellules microgliales, et ainsi favorise sa réplication. Usurping the host ubiquitination proteasome system (UPS) to inactivate the undesirable host protein is a common viral strategy. HIV-1 proteins inactivate the detrimental host proteins by this system. In Microglial cells, CTIP2 represses both initial phase and late phase of HIV-1 gene transcription. As HIV-1 can still replicate in the presence of CTIP2, we postulated that it might inactivate CTIP2 by using Cul4 E3 ubiquitin ligase complex to resume its replication. We observed higher CTIP2 expressions in the absence of Vpr, with no effect on CTIP2 mRNA and proteasome inhibitor can block this degradation. Co-immunoprecipitation assays showed that CTIP2 is associated with DCAF1 and DDB1 in the absence and presence of Vpr. We showed that this degradation is prevented by the using Vpr mutant (Q65R) and by knock down of DCAF1. Finally, we observed the co-localization of CTIP2 with Cul4A-DCAF1-DDB1 complex even in the absence of Vpr, in microglial cells. Additionally, DCAF1 interacts with CTIP2-associated heterochromatin enzymes complex. Our results suggest that Vpr expression increases the turnover of CTIP2 in HIV-1 productively infected cells. By degrading CTIP2, HIV-1 counteracts CTIP2-mediated silencing of its expression and favors its replication. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 19429912 Université de Strasbourg Strasbourg 2013-12-31 https://theses.hal.science/tel-00923199 application/pdf 19234578 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2013/ALI_SULTAN_2013_ED414.pdf http://www.theses.fr/2013STRAJ016/abes https://theses.hal.science/tel-00923199 https://theses.hal.science/tel-00923199 https://theses.hal.science/tel-00923199 Ali Sultan 1983-10-13 PK 174430582 40812398 https://theses.fr/2013STRAJ016 2013STRAJ016 https://doi.org/10.70675/61778c73zca02z4120zb9f2z3c0f77ea7a33 2013-04-02 Virologie : aspects moléculaires et médicaux Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Rohr Olivier MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 117389307 Schwartz Christian MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_2 156584190 Vitale Nicolas MADS_PRESIDENT_DU_JURY Bausero Pedro MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 Margottin-Goguet Florence MADS_RAPPORTEUR_1 Ekström Tomas MADS_RAPPORTEUR_2 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 VS 156502844 Physiopathologie et médecine translationnelle (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 EA 4438 157666581 136980 ddc:570 ddc:610 Rohr Olivier Schwartz Christian Vitale Nicolas Bausero Pedro Margottin-Goguet Florence Ekström Tomas École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg) Physiopathologie et médecine translationnelle (Strasbourg) PDF 19429912 restriction 2013-04-02 2014-01-01 restriction 2013-04-02 2014-01-01