Les peptides antimicrobiens dérivés de la chromogranine A et Staphylococcus aureus : de l'analyse de l'interaction hôte-pathogène au développement de revêtement de polymère antimicrobien
Antimicrobial chromogranin A derived peptides and Staphylococcus aureus : from host pathogen interaction analysis to development of antimicrobial polymer coating
Staphylococcus aureus
Leucotoxine
LukE/D
L'immunité innée
Les peptides antimicrobiens
Chromogranines
Cateslytin
Revêtement de polymère antimicrobien
Biomatériaux antimcrobiens
Staphylococcus aureus
Leukotoxin
LukE/D
Innate immunity
Antimicrobial peptides
Chromogranins
Cateslytin
Antimicrobial polymer coating
Antimicrobial biomaterial
572.6
615
Antibiotiques peptidiques
Relations hôte-parasite
Protéines bactériennes
Chromogranine A
Les chromogranines (Cgs) sont une famille de protéines acides exprimées dans les granules des cellules neuroendocrines et immunitaires. Plusieurs peptides dérivés des Cgs présentent des activités antimicrobiennes. L’objectif de ma thèse est d’évaluer l’interaction hôte-pathogène et ensuite de développer un polymère antimicrobien avec insertion du peptide antimicrobien cateslytin (CTL).Dans une première partie, nous avons évalué l’aptitude de la leukotoxine LukE/D à induire la sécrétion des neutrophiles et rôle des protéases bactériennes à dégrader les peptides dérivés de la CgA. Les neutrophiles activés sécrètent de nombreux composés que nous avons identifiés. De plus, la dégradation des PAMs dérivés de la CgA par les protéases de S.aureus a été déterminée. Sur tous les PAMs testés, CTL est le seul qui tue S.aureus et résister à dégradation. Par ailleurs, CgA et CgB sont dégradés par la protéase Glu-C pour produire de nouveaux fragments sans activité antibactérienne, mais d’activité antifongique.Dans une deuxième partie, nous avons décidé de préparer un revêtement conjugué à CTL. CTL-C est utilisé pour préparer des films avec le dépôt alterné de CHI et HA-CTL-C. Par la suite nous avons synthétisé HAFITC-CTL-C and HAFITC pour analyser leur interaction. HAFITC-CTL-C est rapidement détectable dans le cytoplasme sans provoquer la lyse cellulaire. De plus, les films contenant CTL-C ne sont pas toxiques pour les fibroblastes gingivaux humains.En conclusion, CTL est le seul peptide antimicrobien dérivé de la CgA qui peut tuer S.aureus et résiste à la dégradation protéolytique, ce qui est de bon augure pour de nouvelles études visant à développer des biomatériaux antimcrobiens.
Chromogranins (Cgs) are a family of acidic proteins, expressed in secretory granules of neuro-endocrine and immune cells. Several Cgs derived peptides express antimicrobial activity. Current study was aimed to evaluate host-pathogen interaction and ultimately to develop antimicrobial polymer with insertion of cateslytine (CTL).In first part, stimulatory ability of leukotoxin LukE/D to induce neutrophils secretions and role of bacterial proteases to degrade CgA-derived AMPs was evaluated. Activated neutrophils secrete various components which were identified. Later by using antimicrobial assays, several fractions were found active and later discussed with respect to proteomic analysis. Additionally, degradation of CgA derived AMPs by S. aureus proteases was demonstrated. Out of various AMPs tested, CTL was only that can kill S. aureus and resist protease degradation. Furthermore, CgA and CgB are processed by Glu-C protease to produce new fragments lacking antibacterial activity but presenting antifungal activity.Secondly, we aimed to prepare CTL conjugated biomaterial coating. CTL-C was used to prepare PEM films with alternative deposition of CHI and HA-CTL-C and evaluated for antimicrobial activities. Later on, we synthesized HAFITC-CTL-C and HAFITC to analyze their interaction. HAFITC-CTL-C was readily detectable in cytoplasm without provoking cell lysis. Moreover CTL-C inserted PEM films are non-toxic to human gingival fibroblast cells.In conclusion, CTL is the only CgA-derived AMP that can kill S. aureus and resistant to proteolytic degradation, which is a promising feature for further studies in order to develop antimicrobial biomaterials.
Electronic Thesis or Dissertation
Text
en
PDF
10096674
Université de Strasbourg
Strasbourg
2013-12-31
https://theses.hal.science/tel-01059511
application/pdf
9489172
https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2013/Aslam_Rizwan_2013_ED414.pdf
http://www.theses.fr/2013STRAJ017/abes
https://theses.hal.science/tel-01059511
https://theses.hal.science/tel-01059511
https://theses.hal.science/tel-01059511
https://theses.hal.science/tel-01059511
Aslam
Rizwan
1985-03-03
PK
174486928
40812397
https://theses.fr/2013STRAJ017
2013STRAJ017
https://doi.org/10.70675/89a552b3z49b6z4c4ez8f49z50e8a6f7506f
2013-04-15
Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie
Strasbourg
131056549
Doctorat
Docteur es
non
oui
Metz
Marie-Hélène
MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1
076562859
Prévost
Gilles
MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_2
034102639
Bechinger
Burkhard
MADS_PRESIDENT_DU_JURY
Jacques
Philippe
MADS_MEMBRE_DU_JURY_1
Berjeaud
Jean-Marc
MADS_RAPPORTEUR_1
Drider
Djamel
MADS_RAPPORTEUR_2
École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....)
MADS_ECOLE_DOCTORALE_1
VS
156502844
Biomatériaux et ingénierie tissulaire (Strasbourg ; 2003-2012)
MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1
UMR_S977
157714764
207092
ddc:570
ddc:610
Metz
Marie-Hélène
Prevost
Gilles
Bechinger
Burkhard
Jacques
Philippe
Berjeaud
Jean-Marc
Drider
Djamel
École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg)
Biomatériaux et ingénierie tissulaire (Strasbourg)
PDF
10096674
restriction 2013-04-15 2014-08-31
restriction 2013-04-15 2014-08-31