Note ABES Etude du récepteur humain de la mélatonine MT1 par des approches in vitro : mise au point des conditions de production, de purification et de caractérisation fonctionnelle Study of human melatonine MT1 receptor by in vitro approaches : development of condition of production, purification and fonctional characterization Récepteurs couplés aux protéines G Récepteur humain de la mélatonine MT1 Récepteur humain de l’adénosine A2A Production Purification Études in vitro G protein coupled receptor Human melatonin MT1 receptor Human adenosine A2A receptor Production Purification In vitro studies 572.8 Mélatonine Récepteurs -- Effets des médicaments Récepteurs couplés aux protéines G Rythmes circadiens Régulation génétique Le récepteur humain de la mélatonine MT1 appartient à la famille des récepteurs couplés aux protéines G (RCPG). En raison du rôle majeur qu'il joue dans la régulation du rythme circadien, ce récepteur est impliqué dans les troubles du sommeil et la dépression et présente donc un intérêt thérapeutique important. Afin de progresser vers une meilleure caractérisation structurale et fonctionnelle de ce récepteur, nous avons élaboré une stratégie globale visant à générer les échantillons et méthodes nécessaires pour de telles études. Nous avons ainsi mis au point un ensemble original de conditions de production et de purification permettant d'isoler les récepteurs MT1 sous forme relativement pure, homogène et fonctionnelle. Parallèlement, à partir d'un RCPG de référence, le récepteur de l’adénosine A2A, nous avons mis au point un panel de techniques d’analyses biochimiques et biophysiques qui contribuent à une caractérisation fine des récepteurs purifiés et leur interaction avec des ligands. The human MT1 melatonin receptor belongs to the family of G protein-coupled receptors (GPCRs). It plays a major role in the regulation of circadian rhythm and is involved in sleep disorders and depression. This receptor is thus of significant therapeutic interest. However, very few in vitro studies have been conducted on this receptor and in particular no structural characterization and interactio studies by biophysical methods. In order to progress on these aspects, we developed conditions of production and purification of MT1 receptors for obtaining samples compatible with this type of study. Furthermore, we initiated stabilization tests of the purified receptors. Meanwhile, we have developed biochemical and biophysical analysis techniques to characterize the purified receptors and study their interactions with ligands, on a reference GPCR, the A2A adenosine receptor. Electronic Thesis or Dissertation Text fr PDF 17188862 Université de Strasbourg Strasbourg 2015-12-31 https://theses.hal.science/tel-01136064 https://theses.hal.science/tel-01136064 application/pdf 10067812 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2013/Logez_Christel_2013_ED414.pdf http://www.theses.fr/2013STRAJ073/abes https://theses.hal.science/tel-01136064 https://theses.hal.science/tel-01136064 https://theses.hal.science/tel-01136064 Logez Christel 1984-01-12 FR 176956212 21014659 https://theses.fr/2013STRAJ073 2013STRAJ073 https://doi.org/10.70675/b13430cezc90dz42d7za395zad882ea2baf8 2013-11-27 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Simonin Frédéric MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 129080098 Wagner Renaud MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_2 184545153 Hibert Marcel MADS_PRESIDENT_DU_JURY 061167703 Ferry Gilles MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 183910737 Jockers Ralf MADS_RAPPORTEUR_1 095221093 Mouillac Bernard MADS_RAPPORTEUR_2 11991302X École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 VS 156502844 Biotechnologie et signalisation cellulaire (Strasbourg ; 2011-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 207563 157715205 ddc:570 Simonin Frédéric Wagner Renaud Hibert Marcel Ferry Gilles Jockers Ralf Mouillac Bernard École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg) Biotechnologie et signalisation cellulaire (Strasbourg) PDF 17188862