Note ABES Molecular mechanisms of PLK1 recognition by CUL3/KLHL22 E3-ubiquitin ligase controlling mitotic progression Mécanismes moléculaires de reconnaissance de PLK1 par l’E3-ubiquitine ligase CUL3/KLHL22 contrôlant la progression mitotique Mitose Ubiquitin Cullin Kinases Protéines BTB-Kelch CUL3 PLK1 KLHL22 Mitosis Ubiquitin Cullin Kinases BTB-Kelch protein CUL3 PLK1 KLHL22 571.8 572.8 Mitose Cytologie du développement Aspect moléculaire Ubiquitinylation Dissertations universitaires Ubiquitin-protein ligases Dissertations universitaires Éléments de régulation transcriptionnelle Dissertations universitaires L’ubiquitination est une modification post-traductionnelle impliquée dans de nombreux mécanismes cellulaires. L’E3-ubiquitine ligase CULLIN 3 (CUL3) est un régulateur essentiel de la progression mitotique, ubiquitinant d’importants régulateurs mitotiques et contrôlant leur localisation subcellulaire. Plus particulièrement, notre travail décrit le rôle de la nouvelle E31 ligase CUL3/KLHL22 dans la régulation de l’activité localisée de Polo-like kinase 1 (PLK1) et de ce fait dans l’établissement d’une progression mitotique précise. Néanmoins, les mécanismes moléculaires qui régissent la reconnaissance de son substrat par CUL3 demeurent inconnus. L’activité catalytique de PLK1 ne semble pas être nécessaire à son interaction avec KLHL22, mais aussi bien son domaine kinase que Polo-box (PBD) suffisent à co-purifier KLHL22. Des mutations au niveau du motif DFG, situé en amont du domaine kinase,et du tryptophane 414 au sein du PBD semblent influer sur la reconnaissance de KLHL22. Les résultats obtenus montrent les premières indications biochimiques du mode d’interaction du complexe CUL3/KLHL22/PLK1. Ubiquitination is a post-translational modification involved in many cellular processes. The E3 ubiquitin-ligase based on CULLIN 3 protein (CUL3) is an essential regulator of mitotic division in human cells by ubiquitinating several important mitotic regulators and controlling their subcellular localization. In particular, our work described the role of novel CUL3/KLHL22 E3-ligase in regulation of localized activity of Polo-like kinase 1 (PLK1) and there by faithful mitotic progression. However, the molecular mechanisms of substrate recognition by CUL3 remain unknown. The catalytic activity of PLK1 may not be required for binding KLHL22 but both the kinase and the Polo-box domains are sufficient to co-purify KLHL22. Mutating the DFG motif within the kinase domain and the tryptophan 414 within the PBD influence the binding to KLHL22. These results provide first insights into molecular mechanisms of CUL3/KLHL22/PLK1complex. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 27173733 Université de Strasbourg Strasbourg 2015-12-31 application/pdf 104060673 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2014/Metzger_Thibaud_2014_ED414.pdf http://www.theses.fr/2014STRAJ010/abes Metzger Thibaud 1985-10-09 FR 178329983 40402240 https://theses.fr/2014STRAJ010 2014STRAJ010 https://doi.org/10.70675/bf912a3ezc9bcz40d5z854fzb8ac80dae898 2014-03-25 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Sumara Izabela MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 178330132 Ricci Romeo MADS_PRESIDENT_DU_JURY 189067950 Oliferenko Snezhana MADS_RAPPORTEUR_1 189068035 Pintard Lionel MADS_RAPPORTEUR_2 153161671 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 VS 156502844 Institut de génétique et de biologie moléculaire et cellulaire (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 UMR_S964 155263749 93800 ddc:570 Sumara Izabela Ricci Romeo Oliferenko Snezhana Pintard Lionel École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg) Institut de génétique et de biologie moléculaire et cellulaire (Strasbourg) PDF 27173733