Note ABES Caractérisation de MSI2 et MSI3 : deux sous-unités du CRL4 et potentiels régulateurs chromatiniens chez Arabidopsis thaliana Characterization of MSl2 and MSl3 : two CRL4 subunits and potential chromatin regulators in Arabidopsis thaliana Arabidopsis Ubiquitine CRL4 MSI Cycle cellulaire Chromatine Arabidopsis Ubiquitin Chromatin Cell cycle CRL4 MSIs 576.8 Arabidopsis thaliana Cycle cellulaire végétal Ubiquitine Transcription génétique Chromatine La dégradation sélective des protéines par un mécanisme ubiquitine et protéasome 26S dépendant est conservée chez tous les eucaryotes. Les E3 ubiquitine ligases sont les derniers acteurs de la cascade d’ubiquitinylation et sont responsables de la sélection spécifique des protéines cibles pour leur dégradation. Les enzymes E3 de type CRL4 forment des complexes multiprotéiques dont les récepteurs de substrats sont appelés DCAF pour DDB1-CUL4 Associated Factor. Les études réalisées chez les mammifères et les levures ont permis d’identifier une signature spécifique des DCAF : le motif WDxR à la fin d’un domaine WD40. L’analyse bioinformatique a montré l’existence de plus de 85 DCAF potentielles chez Arabidopsis thaliana. Parmi ces récepteurs, nous nous sommes intéressés à une famille multigénique appelée MSI (Multicopy Suppressor of IRA1). Des études précédentes ont permis de montrer que MSI1 et MSI4 participaient chacune à un complexe CRL4 différent capable d’interagir fonctionnellement avec un complexe PRC2 (Polycomb Repressive Complex 2) pour moduler une régulation épigénétique.Les résultats obtenus et décrits dans ce manuscrit mettent en évidence une interaction physique entre les protéines MSI (2 ou 3) et DDB1a suggérant l’existence d’un complexe multimérique incluant CUL4. L’interrogation des données publiques confrontées à nos données expérimentales, nous a permis d’établir que l’expression des deux gènes était régulée de manière cycle cellulaire dépendante. De plus, un mutant perte de fonction msi3 présente un phénotype de retard de croissance suggérant une fonction de contrôle du cycle cellulaire. D’autre part, leur capacité d’interagir avec des régulateurs chromatiniens permet d’envisager une régulation par voie épigénétique. Toutefois, le rôle exact de ces protéines reste à déterminer. Selective protein degradation by the UPS (Ubiquitin Proteasome System) is highly conserved in all eukaryotes. The E3 ubiquitin ligases are the last actors in the ubiquitylation pathway and target specifically the proteins for degradation. CRL4 E3 ligases form multiprotein complexes where the substrate receptors are called DCAFs for DDB1-CUL4 Associated Factor. Studies made in mammals and yeast allowed to highlight a characteristic signature for the DCAFs: the WDxR motif at the end of a WD40 domain. Bioinformatic studies could identify around 85 potential DCAFs in Arabidopsis thaliana. Among those receptors, we were interested in a small multigenic family called MSIs (Multicopy Suppressor of IRA1). Previous studies showed that MSI1 and MSI4 belong to different CRL4 complexes functionally connected to a PRC2 complex (Polycomb Repressive Complex 2). The results obtained and described in this manuscript highlight a physical interaction between MSI (2 or 3) and DDB1a suggesting the existence of a multimeric complex including CUL4. Furthermore, bioinformatic as well as experimental data, allowed us to establish that MSI2 and MSI3 gene expression are cell cycle regulated. Moreover, phenotypic analysis of an msi3 loss of function mutant showed a delayed growth implying a function as cell cycle regulator. On the other hand, the ability of MSI3 to interact with chromatin regulators points to an epigenetic regulatory pathway. However, the exact function of these proteins remains to be determined. Electronic Thesis or Dissertation Text fr PDF 14391831 Université de Strasbourg Strasbourg 2015-12-31 https://theses.hal.science/tel-01350863 application/pdf 3942157 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2014/Jung-Romeo_Sabrina_2014_ED414.pdf http://www.theses.fr/2014STRAJ020/abes https://theses.hal.science/tel-01350863 https://theses.hal.science/tel-01350863 https://theses.hal.science/tel-01350863 Jung-Romeo Sabrina 1986-06-24 FR 183724380 40402048 https://theses.fr/2014STRAJ020 2014STRAJ020 https://doi.org/10.70675/73a9f445zd8faz4ea6za902zd5c615fac5a5 2014-07-22 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Genschik Pascal MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 070321418 Schmit Anne-Catherine MADS_PRESIDENT_DU_JURY 112233090 Gutierrez Crisanto MADS_RAPPORTEUR_1 183724291 Roudier François MADS_RAPPORTEUR_2 164791825 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 VS 156502844 Institut de biologie moléculaire des plantes (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 444 156775727 ddc:570 Genschik Pascal Schmit Anne-Catherine Gutierrez Crisanto Roudier François École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg) Institut de biologie moléculaire des plantes (Strasbourg) PDF 14391831 confidentialité 2014-07-22 2016-08-01 confidentialité 2014-07-22 2016-08-01 confidentialité 2014-07-22 2016-08-01 confidentialité 2014-07-22 2016-08-01