Note ABES In vivo study of the suppression of cell-autonomous and systemic RNA silencing by the Peanut clump virus protein P15 Caractérisation in vivo de la suppression du RNA silencing intracellulaire et systémique par la protéine P15 du Peanut clump virus Virus SiRNA RNA silencing systémique Suppresseur de RNA silencing Peroxisome Virus SiRNA Non-cell autonomous RNAi Suppressor of RNA silencing Peroxisome Piggyback 572.8 581 Phytovirus ARN interférence Protéines virales Virus -- Reproduction (biologie) Interférence par ARN Dissertations universitaires Éléments silenceurs transcriptionnels Dissertations universitaires Chez les plantes, le RNA silencing (RNAi) est le principal mécanisme de défense antivirale. Il est opéré par de petites molécules d’ARN (siRNA), de 21-22nt de long, générées à partir de l’ARN viral par DCL4 et DCL2, respectivement. Ces siRNA confèrent la séquence-spécificité des réactions de défense intracellulaire et peuvent se déplacer à longue distance pour immuniser les cellules saines. En conséquence, les virus ont développé des protéines (VSRs) capables de supprimer ces deux aspects du RNAi. Au cours de cette thèse, j’ai pu démontrer in vivo que la protéine P15 du Peanut clump virus (PCV) est capable de séquestrer les siRNA de 21 et 22nt et qu’elle bloque le mouvement de ces derniers plus efficacement que ceux de 21nt. Pour compenser cette faiblesse, au cours de l’infection par le PCV, P15 est transportée à l’intérieur des peroxisomes en association avec les siRNA qu’elle séquestre. Le confinement des siRNA mobiles de 21nt à l’intérieur de ces organelles conduit à une inhibition du RNAi systémique et stimule fortement la propagation du PCV à travers la plante. Ces travaux définissent une nouvelle stratégie de pathogénèse virale au cours de laquelle une organelle est utilisé pour neutraliser des molécules de défense produites par l’hôte. In plants, RNA interference (RNAi) is the main antiviral defense mechanism. It is initiated through the processing of viral RNA into 21-22nt long siRNA by DCL4 and DCL2, respectively. These siRNA can mediate sequence-specific local defense reactions (cell-autonomous RNAi) or move to distant tissues to prime defenses in naive cells (systemic RNAi). Consequently, viruses have evolved proteins (VSRs) to suppress both aspects of RNAi. In this in vivo study, I show that P15, the VSR of Peanut clump virus (PCV), binds and sequesters both 21nt and 22nt siRNA. Importantly, it stops the movement of 22nt siRNA more efficiently than 21nt siRNA. During infection, P15 is shuttled into peroxisomes, and is able to « piggyback » siRNA into these organelles. By confining mobile DCL4-dependent antiviral 21nt siRNA within peroxisomes, P15 is able to shut down systemic RNAi and strongly promote PCV movement. This work describes a novel pathogenic strategy in which an organelle is used to neutralize host defensive molecules. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 58772497 Université de Strasbourg Strasbourg 2017-12-31 https://theses.hal.science/tel-01673833 application/pdf 63217538 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2016/INCARBONE_Marco_2016_ED414.pdf http://www.theses.fr/2016STRAJ090/abes https://theses.hal.science/tel-01673833 https://theses.hal.science/tel-01673833 https://theses.hal.science/tel-01673833 Incarbone Marco 1984-02-23 IT 204247349 21217006 https://theses.fr/2016STRAJ090 2016STRAJ090 https://doi.org/10.70675/b0047b8ezd15dz40e8zb5f0z79cc9ba50a15 2016-12-05 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Dunoyer Patrice MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 060609575 Pfeffer Sébastien MADS_PRESIDENT_DU_JURY 069221928 Dunoyer Patrice MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 060609575 Pfeffer Sébastien MADS_MEMBRE_DU_JURY_2 069221928 Vaucheret Hervé MADS_MEMBRE_DU_JURY_3 08929128X Brodersen Peter MADS_MEMBRE_DU_JURY_4 204247543 Vaucheret Hervé MADS_RAPPORTEUR_1 08929128X Brodersen Peter MADS_RAPPORTEUR_2 204247543 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 VS 156502844 Institut de biologie moléculaire des plantes (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 156775727 444 ddc:570 ddc:580 Dunoyer Patrice Pfeffer Sébastien Dunoyer Patrice Pfeffer Sébastien Vaucheret Hervé Brodersen Peter Vaucheret Hervé Brodersen Peter École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Institut de biologie moléculaire des plantes (Strasbourg) PDF 58772497 confidentialité 2016-12-05 2017-12-31 confidentialité 2016-12-05 2017-12-31 confidentialité 2016-12-05 2017-12-31 confidentialité 2016-12-05 2017-12-31