Note ABES Etudes des mécanismes d'adressage d'ARN de transfert dans les mitochondries de levure et humaines Study of the mechanisms of tRNA targeting into yeast and human mitochondria Mitochondries Adressage d’ARN de transfert Enolase Mitochondria TRNA import Enolase 572.8 Mitochondries Cytogénétique ARN de transfert Énolase Traduction génétique Des mutations dans le génome mitochondrial donnent lieu à l’apparition de maladies neuro-dégénératives ou de myopathies. Pour développer des approches de thérapie génique pour prévenir de ces syndromes, nous devons mieux comprendre les mécanismes moléculaires d’import mitochondrial des ARN. Pour cela nous tentons de récapituler in vitro l’import des ARN à partir d’extraits cellulaires fractionnés par différentes méthodes telles que la chromatographie d’exclusion ou d’affinité à l’aide d’étiquettes d’ARN ou de protéines. Nos résultats affinent nos connaissances de ces mécanismes et permettent d’avancer l’idée que l’énolase, une enzyme de la glycolyse, n’agit pas seule lors de la première étape de l’import de l’ARNtLys avec anticodon CUU (tRK1). En effet nous avons montré que l’énolase ultra-purifiée ne se fixait plus à tRK1 in vitro, alors que des préparations de mitochondries de levure récapitulaient l’import lorsque diverses fractions ajoutées à l’énolase étaient testées. Les fractionnements d’extraits opérés permettent de cerner certaines protéines qui pourraient fonctionner de concert avec l’énolase pour véhiculer tRK1 vers la mitochondrie. Mutations in the mitochondrial genome give rise to neurodegenerative diseases or myopathies. To develop gene therapy for preventing the appearance of these syndromes, we need to better understand the molecular mechanisms of mitochondrial RNA. For this purpose we try to recapitulate in vitro the import of RNA from cell extracts fractionated by different methods such as exclusion or affinity chromatography using tagged RNAs or proteins. Our results refine our knowledge of these mechanisms and allow to advance the idea that enolase, an enzyme of glycolysis, does not act alone during the first stage of import of tRNALys with anticodon CUU (tRK1). Indeed, we have shown that ultra-purified enolase no longer binds to tRK1 in vitro, while preparations of yeast mitochondria recapitulate the import when various fractions mixed with enolase were tested. The performed extracts fractionation make it possible to point to certain proteins which could work in concert with the enolase to convey tRK1 to mitochondria. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 11343451 Université de Strasbourg Strasbourg 2017-12-31 https://theses.hal.science/tel-02003364 application/pdf 34442026 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2016/BALEVA_Mariia_2016_ED414.pdf http://www.theses.fr/2016STRAJ096/abes https://theses.hal.science/tel-02003364 https://theses.hal.science/tel-02003364 https://theses.hal.science/tel-02003364 https://theses.hal.science/tel-02003364 Baleva Mariia 1990-10-11 RU 204378877 https://theses.fr/2016STRAJ096 2016STRAJ096 https://doi.org/10.70675/f803ac43z1b91z4c63z8905zc4d97c9d9134 2016-12-16 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Université Lomonossov (Moscou) MADS_ETABLISSEMENT_DE_COTUTELLE_1 155733419 Doctorat Docteur es non oui Masquida Benoît MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 169658503 Kamenski Piotr MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_2 203965213 Duchêne Anne-Marie MADS_PRESIDENT_DU_JURY 131342509 Masquida Benoît MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 169658503 Kamenski Piotr MADS_MEMBRE_DU_JURY_2 203965213 Duchêne Anne-Marie MADS_MEMBRE_DU_JURY_3 131342509 Blaise Mickaël MADS_MEMBRE_DU_JURY_4 122062175 Johansen Steinar MADS_MEMBRE_DU_JURY_5 20437989X Patrushev Maksim MADS_MEMBRE_DU_JURY_6 204380197 Tarassov Ivan MADS_MEMBRE_DU_JURY_7 127895744 Blaise Mickaël MADS_RAPPORTEUR_1 122062175 Johansen Steinar MADS_RAPPORTEUR_2 20437989X Patrushev Maksim MADS_RAPPORTEUR_3 204380197 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 156502844 Génétique moléculaire, génomique et microbiologie (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 156733447 93783 ddc:570 Université Lomonossov (Moscou) Masquida Benoît Kamenski Piotr Duchêne Anne-Marie Masquida Benoît Kamenski Piotr Duchêne Anne-Marie Blaise Mickaël Johansen Steinar Patrushev Maksim Tarassov Ivan Blaise Mickaël Johansen Steinar Patrushev Maksim École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Génétique moléculaire, génomique et microbiologie (Strasbourg) PDF 11343451 confidentialité 2016-12-16 2019-01-01 confidentialité 2016-12-16 2019-01-01 confidentialité 2016-12-16 2019-01-01 confidentialité 2016-12-16 2019-01-01