Les Nanobodies, un nouvel outil de diagnostic de la maladie du court-noué de la vigne
Langue Français
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Modalités de diffusion de la thèse :
  • Thèse confidentielle jusqu'au 20/06/2018.
 
Auteur : Ackerer, Léa
Date de soutenance : 21-06-2016

Directeur(s) de thèse : Demangeat, Gérard - Ritzenthaler, Christophe

Président : Candresse, Thierry
Rapporteur(s) : Candresse, Thierry - Desbiez, Cécile
Membre(s) du jury : Ziegler-Graff, Véronique - Reynard, Jean-Sébastien

Établissement de soutenance : Strasbourg
Laboratoire : Santé de la vigne et qualité du vin (Strasbourg)
École doctorale : École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....)
 
Discipline : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie
Classification : Sciences de la vie, biologie, biochimie, Plantes. Botanique

Mots-clés libres : Nanobodies, Diagnostic, GFLV, ArMV, DAS-ELISA
Mots-clés :
  • Court-noué - Diagnostic immunologique
  • Déterminants antigéniques
  • Anticorps antivirus
  • Chaines lourdes des immunoglobulines - Dissertations universitaires
Résumé : La maladie du court-noué est principalement causée en Europe par le Grapevine fanleaf virus (GFLV) et l’Arabis mosaic virus (ArMV). Le principal moyen de lutte contre sa dispersion consiste à certifier l’absence de ces virus dans les vignes commercialisées par des méthodes sérologiques tels que le DAS-ELISA. De par leurs propriétés biophysique et structurale exceptionnelles, les Nanobodies (Nb) issus des domaines variables d’immunoglobulines (Ig) composées uniquement de chaînes lourdes, se distinguent avantageusement des Ig conventionnelles. L’objectif majeur de ma thèse était d’établir un test de diagnostic du court-noué à base de Nb. À partir de deux collections de Nb contre le GFLV et l’ArMV, j’ai identifié des Nb reconnaissant un large spectre d’isolats viraux. Leur fusion à une protéine fluorescente ou à la phosphatase alcaline a conduit à l’obtention de réactifs de détection performants du GFLV et de l’ArMV par DAS-ELISA. La structure atomique d’un complexe Nb/GFLV résolue à 2.8 Å par cryomicroscopie électronique a permis de cartographier l’épitope en surface du virus et a révélé une couverture maximale de la particule virale par le Nb. La comparaison des tests Nb à des réactifs sérologiques commerciaux a révélé leur supériorité en terme de sensibilité et de spécificité, ouvrant ainsi la voie à la commercialisation d’un nouveau test de diagnostic des virus du court-noué de la vigne.
 
Type de contenu : Text
Format : PDF
 
Entrepôt d'origine : STAR : dépôt national des thèses électroniques françaises
Identifiant : 2016STRAJ103
Type de ressource : Thèse