Développement d'approches spectroscopiques infrarouge exaltées de surface et Raman couplée à l'électrochimie pour l'étude du mécanisme réactionnel des protéines membranaires
Langue Anglais
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Auteur : Grytsyk, Natalia
Date de soutenance : 01-12-2017

Directeur(s) de thèse : Hellwig, Petra

Président : Schalk, Isabelle
Rapporteur(s) : Szunerits, Sabine - Gasnier, Bruno

Établissement de soutenance : Strasbourg
Laboratoire : Chimie de la matière complexe (Strasbourg)
École doctorale : École doctorale des Sciences chimiques (Strasbourg ; 1995-....)
 
Discipline : Chimie
Classification : Chimie, minéralogie, cristallographie, Sciences de la vie, biologie, biochimie

Mots-clés libres : Perfusion-SEIRAS, Lactose perméase, Glu325, Complexe I, IM30, SERS-électrochimie, Grille d’or, Cyt c, Hb, Mb, Cbb3 oxydase
Mots-clés :
  • Protéines membranaires
  • Spectroscopie infrarouge
  • Spectroscopie Raman
  • Électrochimie
Résumé : Cette thèse concerne le développement d’approches spectroscopiques infrarouge et Raman exaltées de surface: la spectroscopie infrarouge exaltée de surface (SEIRAS) combinée avec une cellule de perfusion et la spectroscopie Raman exaltée de surface (SERS) couplée avec l’électrochimie. Dans le cadre du premier projet, différentes protéines ont été étudiées : lactose perméase (LacY), complexe I et IM30. Nous avons déterminé le pKa de Glu325 dans LacY sauvage et dans différents mutants portant des mutations dans le centre actif de translocation des protons. Sauvage complexe I a été oxydé avec différents agents oxydants et réduit avec NADH. Spectres différentiels correspondants ont été analysés. Des changements conformationnels dans la protéine IM30, induits par la présence des ions Mg2+, ont été observés.Dans le cadre du deuxième projet, une cellule spectroélectrochimique contenant une grille d’or a été adaptée pour étudier des protéines redox actives. Cette grille d’or sert à la fois de substrat SERS et d’électrode de travail. Cyt c, Hb et Mb ont d'abord été utilisés pour valider la configuration, puis l'approche a été étendue pour étudier une protéine membranaire.
 
Type de contenu : Text
Format : PDF
 
Entrepôt d'origine : STAR : dépôt national des thèses électroniques françaises
Identifiant : 2017STRAF057
Type de ressource : Thèse