Note ABES Conception et application de nouveaux outils photochimiques pour l’étude des récepteurs canaux P2X Conception and application of new photochemical tools to study P2X receptors P2XR Photochimie Électrophysiologie patch-clamp P2XR Photochemistry Patch-clamp electrophysology 547.2 578.2 Récepteurs purinergiques P2X Acides aminés -- Synthèse (chimie) Photochimie Patch-clamp Les récepteurs P2X (P2XR), activés par l’ATP, sont impliqués dans des rôles physiopathologiques. Leur fonctionnement est associé à différents états conformationnels. Le projet de thèse a mené à associer la synthèse organique et l’application de molécules photo-activables avec des techniques d’électrophysiologie patch-clamp, pour décortiquer les mouvements moléculaires de ces récepteurs et effectuer des relations structure-fonction, via trois stratégies : - La synthèse et application d’agrafes photo-isomérisables qui permet le photo-contrôle des P2XR et l’étude de mouvements - La synthèse et caractérisation d’un acide aminé (aa) photo-clivable pour étudier les implications de zones sur la fonction des P2XR via une photolyse - L’incorporation d’un aa non naturel dans les P2XR pour étudier des interactions et mouvements via un « photo-pontage ». Nous avons élucidé les mécanismes moléculaires responsables de la perméabilité des P2XR, récusé l’existence de l'état dilaté et identifié un cation organique physiologique pouvant les traverser. Nous avons aussi conçu un acide aminé photo-clivable pouvant mener à des études structure-fonction des P2XR. P2X receptors are cationic ligand-gated ion channels, activated by extracellular ATP, involved in many physio-pathological roles. Their function is associated with different allosteric states. During this PhD, we have designed three new strategies, spanning photochemical organic synthesis and patch-clamp electrophysiology to elucidate the molecular mechanisms involved in these conformational states and to collect data in order to study structure-function relationships. - Synthesis and application of molecular tweezers, which allows the photo-control of P2X Rand the study of molecular motions - Synthesis and characterization of a photo-cleavable amino acid with the aim of incorporating it into P2XR and doing structure-function relationships - Incorporation of an unnatural amino acid for photo-crosslinking studies. We have been able to probe the molecular mechanism involved in large organic cations permeation of P2XR, to bring into question the dilated state and to identify a physiological cation that can flow through P2XR. We have also designed a photo-cleavable amino acid which could serve in the study of structure-function relationships. Electronic Thesis or Dissertation Text fr PDF 17461997 Université de Strasbourg Strasbourg 2018-12-31 https://theses.hal.science/tel-01716267 application/pdf 17172984 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2017/Peverini_Laurie_2017_ED222.pdf http://www.theses.fr/2017STRAF061/abes https://theses.hal.science/tel-01716267 https://theses.hal.science/tel-01716267 https://theses.hal.science/tel-01716267 https://theses.hal.science/tel-01716267 https://theses.hal.science/tel-01716267 https://theses.hal.science/tel-01716267 Peverini Laurie 1991-04-27 FR 224354663 21201992 https://theses.fr/2017STRAF061 2017STRAF061 https://doi.org/10.70675/a6912eafz6d7ez4133z9d9ezf2ee50281f65 2017-11-02 Chimie biologique et thérapeutique Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Specht Alexandre MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 084553839 Grutter Thomas MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_2 170545598 170545598 Renard Pierre-Yves MADS_PRESIDENT_DU_JURY 122924029 Paoletti Pierre MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 142890952 Boué-Grabot Eric MADS_RAPPORTEUR_1 112128076 112128076 Rondard Philippe MADS_RAPPORTEUR_2 176742069 176742069 École doctorale des Sciences chimiques (Strasbourg ; 1995-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 CH 156504081 Chémo-biologie synthétique et thérapeutique (Strasbourg ; 2009-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 UMR 7199 157555011 207315 ddc:540 ddc:570 Specht Alexandre Grutter Thomas Renard Pierre-Yves Paoletti Pierre Boué-Grabot Eric Rondard Philippe École doctorale Sciences chimiques (Strasbourg) Conception et application de molécules bioactives (Strasbourg) PDF 17461997