Développement de nouvelles approches génériques de spectrométrie de masse pour la quantification de protéines thérapeutiques dans des études précliniques
Langue Anglais
Accéder au document

Ce document est protégé en vertu du Code de la Propriété Intellectuelle.

Modalités de diffusion de la thèse :
  • Thèse confidentielle jusqu'au 08/12/2018.
  • AccŽs réservé à l'ensemble de la communauté universitaire jusqu'au 08/12/2018 (communication intranet).
 
Auteur : Lanshoeft, Christian
Date de soutenance : 08-12-2017

Directeur(s) de thèse : Cianférani-Sanglier, Sarah

Président : Brun, Virginie Milena
Rapporteur(s) : Bischoff, Rainer - Huber, Christian
Membre(s) du jury : Beck, Alain - Heudi, Olivier

Établissement de soutenance : Strasbourg
Laboratoire : Institut pluridisciplinaire Hubert Curien (Strasbourg ; 2006-....)
École doctorale : École doctorale des Sciences chimiques (Strasbourg ; 1995-....)
 
Discipline : Chimie analytique
Classification : Chimie, minéralogie, cristallographie

Mots-clés libres : Spectrométrie de masse, Quantification des anticorps, Études précliniques
Mots-clés :
  • Spectrométrie de masse
  • Analyse quantitative (chimie)
  • Approche ascendante
  • Protéomique
  • Anticorps
  • Échantillons microscopiques -- Préparation
Résumé : Ce travail de thèse s’est focalisé sur le développement des approches génériques de spectrométrie de masse (MS) pour la quantification des anticorps monoclonaux (mAbs) et de leurs produits dérivés dans des études précliniques. Premièrement, le développement des protocoles de préparation d’échantillons basée sur la digestion directe à partir de sérum ou comportant une étape d’immuno-précipitation spécifique par anticorps a permis la quantification des mAbs couvrant une large gamme d'étalonnage de cinq ordres de grandeur. En outre, l'emploi de peptides provenant de la région constante du mAb a démontré la polyvalence de telles approches génériques de chromatographie liquide en tandem MS (LC-MS/MS). Deuxièmement, les instruments de MS à haute résolution (HRMS) ont étés évalués dans le cadre de cette thèse en tant qu'alternative aux spectromètres de masse de type triple quadripôle traditionnellement utilisés pour l’analyse bottom-up quantitative. L’avantage majeur de l’intégration des analyseurs de HRMS a été associé à la possibilité de l’analyse quantitative simultanée des mAbs et leurs produits associés directement au niveau de la protéine fournissant un niveau d'informations bien au-delà de celui obtenu avec des approches bottom-up. Par conséquent, l’apport essential de la HRMS pour les analyses qualitative et quantitative des protéines thérapeutiques de type mAbs et produits associés a été démontré dans cette thèse.
 
Type de contenu : Text
Format : PDF
 
Entrepôt d'origine : STAR : dépôt national des thèses électroniques françaises
Identifiant : 2017STRAF070
Type de ressource : Thèse