Note ABES Impact des contraintes physiques sur la maturation des mégacaryocytes : rôle de la rigidité de l'environnement Impact of physical constraints on megakaryocytes’ maturation : role of the environmental stiffness Mégacaryocyte Rigidité Environnement Mécanobiologie Culture 3D Megakaryocyte Stiffness Environment Mechanobiology 3D culture 571.4 571.8 Mégacaryocytes Propriétés mécaniques Différenciation cellulaire Transduction du signal cellulaire Protéines du cytosquelette La mégacaryopoïèse regroupe l’ensemble des processus de différenciation et de maturation des mégacaryocytes (MKs) dans le but de produire des plaquettes capables d’arrêter les saignements. Or ces mécanismes sont mal connus. Afin de mieux les comprendre, nous avons mimé l’environnement médullaire in vitro, en 3D à l’aide d’un hydrogel de rigidité comparable à celle de la moelle osseuse. Dans cette étude nous avons: i) caractérisé le comportement physique de l’hydrogel de méthylcellulose et mis au point la culture de progéniteurs mégacaryocytaires dans ce système, ii) montré la capacité du MK à ressentir les contraintes physiques de son environnement, ainsi que, iii) l’impact de ces contraintes sur la maturation des MKs et la génération des proplaquettes, et enfin, iv) mis en évidence l’existence d’une réponse cellulaire des MKs à la rigidité. Les MKs sont « mécanosensibles », c’est-à-dire capables de ressentir les modifications physiques de leur environnement et de s’y adapter. L’activation de voies de mécanotransduction (dont MKL1) et la réorganisation du cytosquelette en réponse aux contraintes physiques extracellulaires favorisent la maturation des MKs, en termes de ploïdie, d’ultrastructure et in fine de génération de proplaquettes. Megakaryopoiesis is the process of differentiation and maturation of megakaryocytes (MKs) in the aim to produce platelets able to prevent hemorrhages. These mechanisms are not well known. To better understand the process of platelet formation, we mimicked the medullar microenvironment in vitro, in 3D using hydrogel of stiffness comparable to the bone marrow. In this study we: i) characterized the physical properties of the hydrogel and design the culture of hematopoietic progenitors in this system, ii) showed the MKs ability to feel the physical constraints of their environment, then iii) showed the impact of these constraints on the MK maturation and proplatelet generation, and finally iv) highlighted the MK response to stiffness. MKs are “mecanosensitives”, being able to feel and to adapt to the physicals modifications of the environment. The activation of mechanotransduction pathways (including MKL1) and the cytoskeleton reorganization in response to extracellular physical constraints improves MK maturation, in terms of ploïdy, ultrastructure and ultimately proplatelet generation. Electronic Thesis or Dissertation Text fr PDF 40692347 Université de Strasbourg Strasbourg 2017-12-31 https://theses.hal.science/tel-01560013 application/pdf 94240939 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2017/Aguilar_Alicia_2017_ED414.pdf http://www.theses.fr/2017STRAJ014/abes https://theses.hal.science/tel-01560013 https://theses.hal.science/tel-01560013 https://theses.hal.science/tel-01560013 Aguilar Alicia 1990-06-08 FR 203033760 40800382 https://theses.fr/2017STRAJ014 2017STRAJ014 https://doi.org/10.70675/d09586a6z3939z4cbcz8986za103a8872ae0 2017-04-10 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Léon Catherine MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 182110605 Galzi Jean-Luc MADS_PRESIDENT_DU_JURY 032508999 Payrastre Bernard MADS_RAPPORTEUR_1 066827949 Le Bousse-Kerdiles Marie-Caroline MADS_RAPPORTEUR_2 092164927 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 VS 156502844 Biologie et pharmacologie des plaquettes sanguines : hémostase, thrombose, transfusion (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 157547531 81496 ddc:570 Léon Catherine Galzi Jean-Luc Payrastre Bernard Le Bousse-Kerdiles Marie-Caroline École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg) Biologie et pharmacologie des plaquettes sanguines : hémostase, thrombose, transfusion (Strasbourg) PDF 40692347