Note ABES Développement par génie tissulaire d’un modèle de peau humaine innervée, vascularisée et immunocompétente pour l’étude des réactions inflammatoires cutanées Development of an immunocompetent, innervated and vascularized human tissue-engineered skin model for the study of cutaneous neuro-immune interactions Cellules dendritiques cutanées Neurones sensoriels de la peau Peau Biotechnologies Cellules souches pluripotentes induites Sensibilisation Skin Tissue engineering Biotechnology Induced pluripotent stem cells Dendritic cells Sensory neurons Sensitization 572.8 660.6 Peau Immunologie Immunomodulation Génie tissulaire Cultures cellulaires Les réactions immunitaires de la peau sont initiées par les cellules dendritiques cutanées (dendritic cells, DCs). L'effet potentiellement sensibilisateur d'un composé peut être prédit in vitro en utilisant des monocytes humains différenciés en DCs (MonoDCs). Cependant, ces modèles simplistes restent imprécis car l'activation des DCs cutanés par les sensibilisateurs peut être déclenchée ou modulée par des interactions microenvironnementales avec de multiples types de cellules non immunitaires. Notre objectif est de développer une peau immunocompétente qui combinera des MonoDCs avec tous les éléments structurels et fonctionnels de la peau, c'est-à-dire une barrière épidermique posée sur un derme contenant une pseudo-vascularisation et des neurones nociceptifs. Une matrice de collagène a été ensemencée avec des fibroblastes et des cellules endothéliales, puis avec des précurseurs de fibres nerveuses dérivées soit de l'iPSC humaine, soit de la DRG embryonnaire murins. Enfin, nous avons introduit les MonoDC et les kératinocytes. Nous avons observé que les neurones différenciés in situ innervent l'épiderme comme observé habituellement dans la peau humaine normale. De plus, les neurones dérivées d’iPSCs, expriment neuropeptides et canaux calcique spécifiques des fibres nociceptives. Enfin, les Mono-DC intégrés au modèle restent stable pendant toute la durée nécessaire à la formation de l’épiderme et peuvent être stimulé. Le modèle sera utilisé pour prédire le potentiel irritant des composés chimiques et l'impact de l’innervation nociceptive sur l'activation des DCs. Immune reactions in the skin are initiated by the cutaneous dendritic cells (DCs). The potential sensitizing effect of a compound can be predicted in vitro using human monocytes differentiated into DCs (Mono-DCs). However, these simplistic models remain inaccurate because the activation of cutaneous DCs by sensitizers may be triggered or modulated by microenvironmental interactions with multiple types of non-immune cells. Our goal is to develop an immunocompetent human tissue-engineered skin that will combine DCs with all structural and functional element of the skin, i.e. an epidermal barrier laid upon a dermis containing a pseudo-vascularization and nociceptive neurons. Collagen matrix was seeded with fibroblasts and endothelial cells, then with precursors of nerve fibers derived from either human iPSC or murine embryonic DRG. Finally, we introduced Mono-DCs and keratinocytes. We observed that in situ differentiated neurons grow axons towards the epidermis as usually observed in normal human skin. What's more, the neurons derive from iPSC, express neuropeptides and calcium channel as normal nociceptive fibers. Moreover, Mono-DCs settled as expected beneath the epidermis and remained sessile to stimulation for several weeks. The model will be used to predict the irritant potential of chemical compounds, and the impact of nerves on DC activation. Electronic Thesis or Dissertation Text fr PDF 26162454 Université de Strasbourg Strasbourg 2019-12-31 https://theses.hal.science/tel-02917981 application/pdf 4377747 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2018/MULLER_Quentin_2018_ED414.pdf http://www.theses.fr/2018STRAJ061/abes https://theses.hal.science/tel-02917981 https://theses.hal.science/tel-02917981 https://theses.hal.science/tel-02917981 https://theses.hal.science/tel-02917981 Muller Quentin Philippe Sylvain 1991-04-13 FR 237602938 https://theses.fr/2018STRAJ061 2018STRAJ061 https://doi.org/10.70675/86d94a9az1f3ez4f45z9cdfzcbbb2714378d 2018-09-28 Biotechnologies (neurosciences et immunologie) Strasbourg 131056549 Université Laval (Québec, Canada) MADS_ETABLISSEMENT_DE_COTUTELLE_1 028035747 Doctorat Docteur es non oui Flacher Vincent MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 088058247 Berthod François MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_2 191913723 Lelièvre Vincent MADS_PRESIDENT_DU_JURY 139276556 Pouliot Roxane MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 237603071 Fromy Bérengère MADS_RAPPORTEUR_1 095049371 Nataf Serge MADS_RAPPORTEUR_2 11097204X École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 156502844 Immunologie, immunopathologie et chimie thérapeutique (Strasbourg ; 2013-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 156771659 256678 ddc:570 ddc:660 Université Laval (Québec, Canada) Flacher Vincent Berthod François Lelièvre Vincent Pouliot Roxane Fromy Bérengère Nataf Serge École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Immunopathologie et chimie thérapeutique (Strasbourg) PDF 26162454 confidentialité 2018-09-28 2019-10-01 confidentialité 2018-09-28 2019-10-01 confidentialité 2018-09-28 2019-10-01 confidentialité 2018-09-28 2019-10-01