Note ABES KAP1 : un nouveau facteur répresseur de la transcription du VIH-1 KAP1 : a new repressor factor of HIV-1 transcription VIH-1 Latence CTIP2 P-TEFb KAP1 SUMO HIV-1 Latency CTIP2 P-TEFb KAP1 SUMO 579.2 572.8 VIH (virus) Immunologie Répresseurs Transcription génétique Latence virale Sumoylation La latence post-intégrative du VIH-1 génère des réservoirs qui empêchent l'éradication du virus avec les thérapies actuelles. La compréhension des mécanismes moléculaires de la latence servirait à l'identification de nouvelles cibles thérapeutiques et le développement de molécules de type LRA (Latency Reversing Agent) permettant la guérison fonctionnelle des patients et un arrêt des traitements. Nous avons démontré que la combinaison de deux types différents de LRAs à base de composés libérant P-TEFb (JQ1, I-BET, I-BET151 et HMBA) ou des agonistes de PKC (prostratine, bryostatine-1 et Ing-B) conduit à une robuste activation synergique de la production du VIH-1 dans divers modèles cellulaires de latence post-intégrative et dans des réservoirs de lymphocytes T CD4+ primaires. Le répresseur transcriptionnel CTIP2 recrute des complexes multienzymatiques pour favoriser l'établissement et la persistance de la latence du VIH-1 dans les cellules microgliales, le principal réservoir viral du système nerveux central. De plus, CTIP2 s’associe au complexe 7SK snRNP pour inhiber P-TEFb, un facteur d’élongation indispensable à l’expression du VIH-1 et à la réactivation des provirus latents. Des expériences d’immunoprécipitations de CTIP2, couplées à la spectrométrie de masse, nous ont permis d’identifier près de 900 partenaires protéiques de CTIP2. Parmi ces nouveaux partenaires, nous avons identifié la SUMO E3 ligase KAP1. Nous montrons que KAP1 réprime les phases précoce et tardive Tat dépendante de la transcription du VIH-1. KAP1 induit une dégradation de Tat, qui est sensible aux modulations de la voie SUMO. En effet, la sumoylation favorise l'association de Tat avec KAP1, de même que sa dégradation. Globalement, nos résultats suggèrent que KAP1 contribue à l'établissement et à la persistance des réservoirs latents du VIH-1. Cibler les voies SUMO constituerait un nouveau champ d'investigation dans le cadre du développement de nouvelles classes de LRAs. The HIV-1 post-integration latency generates reservoirs that prevent the eradication of the virus with the current therapies. The understanding of the molecular mechanisms of this latency enable the identification of new therapeutic targets and the development of LRA (Latency Reversing Agent) for functional cure and treatments interruption. We have demonstrated that the combination of two different LRAs based on P-TEFb releasing compounds (JQ1, I-BET, I- BET151 and HMBA) or PKC agonists (prostratin, bryostatin-1 and Ing-B) leads to robust synergistic activation of HIV-1 production in various cellular models of post-integration latency and in primary CD4+ T cells reservoirs. The transcriptional repressor CTIP2 recruits multienzymatic complexes to promote the establishment and persistence of HIV-1 latency in microglial cells, the main viral reservoir of the central nervous system. Furthermore, CTIP2 binds to the 7SK snRNP complex to inhibit P-TEFb, an elongation factor essential for HIV-1 expression and reactivation of latent proviruses. Immunoprecipitation experiments of CTIP2 coupled to mass spectrometry allowed us to identify almost 900 proteins partners of CTIP2. Among these new partners, we have identified the E3 SUMO ligase KAP1. We found that KAP1 contributes to HIV-1 gene silencing by repressing the initiation and the Tat–dependent steps of the viral gene transcription. KAP1 induces Tat degradation via a SUMO-sensitive pathway. Indeed, favoring the sumoylation promotes Tat association with KAP1 and the resulted Tat degradation. Altogether, our results suggest that KAP1 contributes to the establishment and the persistence of the latently infected HIV-1 reservoirs. Moreover, these results suggest that targeting the SUMO pathways may be a new field of investigation to develop new classes of LRAs for cure strategies. Electronic Thesis or Dissertation Text fr PDF 10466138 Université de Strasbourg Strasbourg 2019-12-31 https://theses.hal.science/tel-02918059 application/pdf 10432588 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2018/AIT-AMMAR_Amina_2018_ED414.pdf http://www.theses.fr/2018STRAJ073/abes https://theses.hal.science/tel-02918059 https://theses.hal.science/tel-02918059 https://theses.hal.science/tel-02918059 https://theses.hal.science/tel-02918059 https://theses.hal.science/tel-02918059 https://theses.hal.science/tel-02918059 Ait Ammar Amina 1986-08-30 FR 237842211 https://theses.fr/2018STRAJ073 2018STRAJ073 https://doi.org/10.70675/bef49303zbb98z444bzb86azf445aa0a34db 2018-09-28 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Rohr Olivier MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 117389307 Gautier Virginie MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_2 171353625 Negroni Matteo MADS_PRESIDENT_DU_JURY 136869025 Rohr Olivier MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 117389307 Gautier Virginie MADS_MEMBRE_DU_JURY_2 171353625 Negroni Matteo MADS_MEMBRE_DU_JURY_3 136869025 Herbein Georges MADS_MEMBRE_DU_JURY_4 108861465 Ciuffi Angela MADS_MEMBRE_DU_JURY_5 185545270 Van Lint Carine MADS_MEMBRE_DU_JURY_6 237842564 Herbein Georges MADS_RAPPORTEUR_1 108861465 Ciuffi Angela MADS_RAPPORTEUR_2 185545270 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 156502844 Dynamique des interactions hôte pathogène (Strasbourg ; 2013-2023) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 176972641 255201 ddc:570 Rohr Olivier Gautier Virginie Negroni Matteo Rohr Olivier Gautier Virginie Negroni Matteo Herbein Georges Ciuffi Angela Van Lint Carine Herbein Georges Ciuffi Angela École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Dynamique des interactions hôte pathogène (Strasbourg) PDF 10466138 confidentialité 2018-09-28 2019-12-31 confidentialité 2018-09-28 2019-12-31 restriction 2018-09-28 2019-12-31 confidentialité 2018-09-28 2019-12-31 confidentialité 2018-09-28 2019-12-31