Note ABES Le piratage de l'appareil de traduction de la cellule hôte par le virus de la paralysie du criquet (CrPV) The host cell translationnal machinery hijacking by the Cricket Paralysis Virus (CrPV) CrPV EIF Initiation de la traduction IRES viraux Ribosome CrPV EIF Translation initiation Viral IRES Ribosome 579.2 572.8 ARN viral Site d'entrée interne des ribosomes Traduction génétique Catantopidés Viroses Relations hôte-virus Le Virus de la Paralysie du Cricket (CrPV) est un virus à ARN qui utilise des « sites d’entrée interne du ribosome » (IRES) pour détourner la machinerie traductionnelle de son hôte et synthétiser ses protéines virales. La traduction de ses deux phases codantes (ORF) est contrôlée par deux IRES différents : l’IRES de la région intergénique (IGR), qui régit la traduction de l’ORF2 et qui a été largement étudié ; et l’IRES de la région 5’UTR du génome viral (IRES5’UTR), qui guide la traduction de l’ORF1 et qui était très mal connu. Nous avons démontré que cet IRES5’UTR appartient à la classe III des IRES. Il recrute spécifiquement et directement le facteur d’initiation eIF3. Son mode d’action s’affranchit de l’étape de ‘scanning’ pour reconnaitre le codon AUG. L’IRES5’UTR comprend deux domaines structuraux qui ont des fonctions distinctes mais qui agissent en synergie pour recruter eIF3 et le ribosome et permettre de guider la progression de l’initiation de la traduction de l’ORF1. En outre, les deux IRES du CrPV utilisent des modes d’action différents, ils sont actifs à des moments différents du processus infectieux. La reconstitution in vitro des complexes d’initiation de la traduction formés sur les deux IRES en cours d’infection a permis d’identifier les protéines spécifiques de chaque IRES lors du cycle viral. À présent nous allons valider l’implication de ces protéines dans la traduction guidée par ces deux IRES. Cette étude ouvre la voie vers la compréhension des mécanismes moléculaires d’action et de régulation des traductions « IRES-dépendantes » des ARN viraux et cellulaires. The Cricket Paralysis Virus (CrPV) is an RNA virus that uses ‘internal ribosome entry sites’ (IRES) to hijack the host translation machinery and synthesize its own viral proteins. The translation of its two open reading frames (ORF) is controlled by two different IRES : First, the IRES located in the Intergenic Region (IGR), which governs translation of ORF2 and has been extensively studied. Second, the IRES located the 5'UTR region from viral genome (IRES5'UTR), which guides the translation of ORF1 and which was very poorly known. During my PhD, we demonstrated that this IRES5'UTR belongs to the class III of the IRES. It specifically and directly recruits the eIF3 initiation factor. Its mode of action is free from the 'scanning' step to recognize the AUG codon. The IRES5'UTR contains two structural domains that have distinct functions, but act in synergy to recruit eIF3 and the ribosome in order to guide ORF1 translation initiation. In addition, both CrPV IRES use different modes of action, they are active at different times in the infectious process. The in vitro reconstitution of translation initiation complexes formed on both IRES during infection allowed us to identify proteins that are specific of each IRES during the viral cycle. Now we will validate the implication of these proteins in the translation guided by both IRES. Electronic Thesis or Dissertation Text fr PDF 29566757 https://publication-theses.unistra.fr/restreint/theses_doctorat/2018/GROSS_Lauriane_2018_ED414.pdf application/pdf 13567429 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2018/GROSS_Lauriane_2018_ED414_INC.pdf https://theses.hal.science/tel-03650061 https://theses.hal.science/tel-03650061 https://theses.hal.science/tel-03650061 https://theses.hal.science/tel-03650061 https://theses.fr/2018STRAJ130/abes https://theses.hal.science/tel-03650061 https://theses.hal.science/tel-03650061 https://theses.hal.science/tel-03650061 Photographies : pages 99-116 Graphiques : pages 99-116 Tableaux : pages 99-137 Texte pages 99 à 116, paragraphe II p 125-136 et partie matériel/méthodes pages 129-137 Gross Lauriane 1991-03-27 FR 238494187 https://theses.fr/2018STRAJ130 2018STRAJ130 https://doi.org/10.70675/c49589fazfc73z47d7z9ab8zca0524c65317 2018-10-26 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Martin Franck MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 177829168 Dimitrova Maria MADS_PRESIDENT_DU_JURY 204203112 Weil Dominique MADS_RAPPORTEUR_1 155155059 Vagner Stephan MADS_RAPPORTEUR_2 076656179 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 156502844 Architecture et réactivité de l'ARN (Strasbourg ; 1992-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 157545687 93780 ddc:570 Martin Franck Dimitrova Maria Weil Dominique Vagner Stéphan École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Architecture et réactivité de l'ARN (Strasbourg) PDF 29566757