Note ABES Développements méthodologiques en spectrométrie de masse structurale pour la caractérisation de complexes biologiques multiprotéiques Structural mass spectrometry developments for the characterization of multiprotein complexes Spectrométrie de masse structurale Échange hydrogène/deutérium Spectrométrie de masse native Pontage chimique Systèmes protéiques complexes HDX-MS Structural mass spectormetry Hydrogen/deuterium exchange coupled to mass spectrometry Native mass spectrometry Crosslink Complex protein systems HDX-MS 543 535.8 Spectrométrie de masse Méthodologie Biomolécules Conformation Deutérium Protéomique Épissage (génétique) Mesure d'échange de deutérium Ce travail de thèse porte sur le développement de méthodes de spectrométrie de masse (MS) structurale pour la caractérisation de systèmes protéiques complexes, souvent réfractaires aux approches biophysiques classiques. Dans ce contexte, les développements entrepris furent notamment focalisés sur la caractérisation de complexes impliqués dans la biogénèse des ribosomes et dans la régulation transcriptionnelle, fonctions cellulaires essentielles pouvant être liées à de nombreuses pathologies humaines dont certains cancers. Ainsi, les approches par MS native, pontage chimique et d’HDX-MS ont permis de renseigner sur la connectivité, les proximités spatiales ou encore la dynamique conformationnelle retrouvées au sein des complexes étudiés. Parmi ces techniques, l’HDX-MS permet une approche comparative basée sur les mesures d’incorporations en deutérium renseignant sur la dynamique conformationnelle d’une protéine sous différents états. Aussi, la combinaison d’approches de MS structurale a permis d’approfondir la caractérisation des systèmes complexes étudiés, démontrant ainsi l’intérêt d’une approche intégrative dans ce contexte. This PhD thesis focuses on developing methods in structural mass spectrometry (MS) to characterize complex protein systems, given their size and their heterogeneity, frequently inaccessible by classical biophysic approaches. In this context, methodological developments have particularly focused on the characterization of protein complexes involved in ribosomes biogenesis and transcriptional regulation. These fundamental cellular processes are related to numerous diseases such as cancers and genetic diseases. Thus native MS, crosslink, and hydrogen/deuterium exchange coupled to MS (HDX-MS) allowed gaining insights about the stoechiometry, spatial proximities and conformational dynamics of studied systems. Among these approaches, HDX-MS enables a comparative approach based on deuterium incorporation measurements giving information about the conformational dynamics of labeled proteins in various experimental conditions. Finally, the combination of structural approaches enables to deeply characterize complex protein systems, highlighting the advantages of an integrative approach in this context. Electronic Thesis or Dissertation Text fr PDF 20812295 Université de Strasbourg Strasbourg 2019-12-31 application/pdf https://publication-theses.unistra.fr/restreint/theses_doctorat/2019/Bourguet_Maxime_2019_ED222.pdf Bourguet Maxime 1990-07-22 FR 240928024 https://theses.fr/2019STRAF013 2019STRAF013 https://doi.org/10.70675/ba485de5zaaacz49c6z9687z91bc6a719799 2019-06-25 Chimie analytique Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Cianférani-Sanglier Sarah MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 070341222 Rochel Natacha MADS_PRESIDENT_DU_JURY 183592468 Cianférani-Sanglier Sarah MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 070341222 Rochel Natacha MADS_MEMBRE_DU_JURY_2 183592468 Schiltz Odile MADS_MEMBRE_DU_JURY_3 155601970 Schmitter Jean-Marie MADS_MEMBRE_DU_JURY_4 076134652 Brier Sébastien MADS_MEMBRE_DU_JURY_5 110265955 Schiltz Odile MADS_RAPPORTEUR_1 155601970 Schmitter Jean-Marie MADS_RAPPORTEUR_2 076134652 École doctorale des Sciences chimiques (Strasbourg ; 1995-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 156504081 Institut pluridisciplinaire Hubert Curien (Strasbourg ; 2006-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 157760502 93777 ddc:540 ddc:530 Cianférani-Sanglier Sarah Rochel Natacha Cianférani-Sanglier Sarah Rochel Natacha Schiltz Odile Schmitter Jean-Marie Brier Sébastien Schiltz Odile Schmitter Jean-Marie École doctorale Sciences chimiques (Strasbourg ; 1995-....) Institut pluridisciplinaire Hubert Curien (Strasbourg) PDF 20812295 confidentialité 2019-06-25 2021-01-01 confidentialité 2019-06-25 2021-01-01 confidentialité 2019-06-25 2021-01-01