Note ABES Etude de la régulation transcriptionnelle de la différenciation des cellules entéroendocrines dans un modèle d'organoïde intestinal humain Transcriptionnal regulation of enteroendocrine cell differentiation study in human intestinal organoids Différenciation entéroendocrine Hormones HiPSCs Organoïdes intestinaux Facteurs de transcription Enteroendocrine differentiation Hormones HiPSCs Intestinal organoids Transcription factors 572.8 Régulation génétique Facteurs de transcription Cellules intestinales Différenciation cellulaire Hormones Cellules souches pluripotentes induites Cellules entéroendocrines Les cellules entéroendocrines sécrétrices d’hormones représentent 1% de l’épithélium intestinal mais sont des régulateurs essentiels du métabolisme énergétique et l’altération de leur différenciation provoque de graves pathologies métaboliques. Leur différenciation est régie par une cascade de régulations transcriptionnelles qui est encore peu décrite, particulièrement chez l’homme. L’objectif de ce projet de thèse était d’évaluer l’implication de plusieurs facteurs de transcription préalablement identifiés chez la souris (NGN3, RFX6, ARX, PAX4) dans la différenciation entéroendocrine humaine. Pour ce faire, ces gènes ont été inactivés par la technique CRISPR/Cas9 dans des cellules souches pluripotentes induites humaines (hiPSCs), qui ont ensuite été différenciées in vitro en organoïdes intestinaux (HIOs). Les analyses des HIOs déficients pour NGN3 ne permettent pas de conclure quant à un rôle dans la différenciation entéroendocrine mais indiquent une altération de la régionalisation du tissu formé chez les mutants. RFX6 semble important pour la différenciation et/ou la fonction des cellules entéroendocrines, bien que sa fonction précise n’ait pas pu être déterminée. Hormone-producing enteroendocrine cells represent 1% of the intestinal epithelium but are key regulators of the energetic metabolism and alteration of their differentiation is associated with severe metabolic disorders. Enteroendocrine differentiation is governed by a transcriptional regulatory cascade that is poorly described, especially in humans. This thesis project aimed to evaluate the implication of several transcription factors, previously identified in mice (NGN3, RFX6, ARX, PAX4), in human enteroendocrine differentiation. To do so, these genes were disrupted with the CRISPR/Cas9 system in human inducible pluripotent stem cells (hiPSCs), which were then differentiated in intestinal organoids (HIOs). Preliminary analysis of NGN3-deficient HIOs did not allow a firm conclusion regarding NGN3 implication in enteroendocrine differentiation but showed a tissue regionalization alteration. RFX6 seems important for the differentiation/function of enteroendocrine cells, although its precise function is still to be determined. Electronic Thesis or Dissertation Text fr PDF 25599971 Université de Strasbourg Strasbourg 2019-12-31 https://theses.hal.science/tel-04588153 application/pdf 28253080 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2019/Giethlen_Colette_2019_ED414.pdf http://www.theses.fr/2019STRAJ002/abes https://theses.hal.science/tel-04588153 https://theses.hal.science/tel-04588153 https://theses.hal.science/tel-04588153 Giethlen Colette 1992-11-25 FR 240194020 https://theses.fr/2019STRAJ002 2019STRAJ002 https://doi.org/10.70675/124d9f75z3ecbz4db0z8ea8z9813fa536613 2019-01-22 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Gradwohl Gérard MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 101547390 Dantzer Françoise MADS_PRESIDENT_DU_JURY 139532145 Gradwohl Gérard MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 101547390 Dantzer Françoise MADS_MEMBRE_DU_JURY_2 139532145 Ribeiro-Pillet Agnès MADS_MEMBRE_DU_JURY_3 143032402 Voz Marianne MADS_MEMBRE_DU_JURY_4 179488112 Ribeiro-Pillet Agnès MADS_RAPPORTEUR_1 143032402 Voz Marianne MADS_RAPPORTEUR_2 179488112 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 156502844 Institut de génétique et de biologie moléculaire et cellulaire (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 155263749 93800 ddc:570 Gradwohl Gérard Dantzer Françoise Gradwohl Gérard Dantzer Françoise Ribeiro-Pillet Agnès Voz Marianne Ribeiro-Pillet Agnès Voz Marianne École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Institut de génétique et de biologie moléculaire et cellulaire (Strasbourg) PDF 25599971 confidentialité 2019-01-22 2024-01-31 confidentialité 2019-01-22 2024-01-31 restriction 2019-01-22 2024-01-31 confidentialité 2019-01-22 2024-01-31 confidentialité 2019-01-22 2024-01-31