Note ABES Import d'ARN dans les mitochondries de cellules humaines : identification à grande échelle et applications thérapeutiques RNA import into mitochondria of human cells : large-scale identification and therapeutic applications Mitochondrie RNome mitochondrial Import d’ARN Stratégie thérapeutique Séquençage d’ARN Mitochondria Mitochondrial RNome RNA import Therapeutic strategy RNA sequencing 572.8 Mitochondriopathies Génétique Translocation (génétique) ADN mitochondrial ARN mitochondrial Génie génétique Les mutations dans le génome mitochondrial humain sont souvent associées à de graves maladies neuromusculaires. Mon projet de thèse a consisté tout d’abord au développement d’une stratégie thérapeutique basée sur l’import mitochondrial de molécules d’ARN. J’ai pu démontrer que l’expression stable de molécules d’ARN recombinantes dans les cellules humaines permet de diminuer le taux de mutations pathogéniques de l’ADN mitochondrial. Dans une seconde partie, j’ai élaboré une nouvelle méthode, CoLoC-seq, permettant l’identification à grande échelle des ARN localisés dans les mitochondries. En appliquant cette méthode sur des cellules humaines, j’ai pu confirmer l’adressage mitochondrial de certains ARN cytosoliques non-codant et identifier de nouveaux ARN potentiellement importés. Ces données permettront d’élargir les connaissances sur les voies d’adressage mitochondrial des ARN, leurs mécanismes et leur régulation, et d’optimiser les stratégies thérapeutiques basées sur l’import d’ARN. Mutations in the human mitochondrial genome are often associated with severe neuromuscular disorders. The first part of my thesis project consisted in the development of a therapeutic strategy based on the mitochondrial import of RNA molecules. I demonstrated that the stable expression of recombinant RNA molecules in human cells induced the decrease of the pathogenic mutation load in mitochondrial DNA. In the second part, I developed a nex method, CoLoC-seq, for the large-scale identification of RNA species localized in the mitochondria. By applying this method to human cells, I confirmed the mitochondrial targeting of some non-coding cytosolic RNAs and identified new potentially imported RNAs. These data will broaden the knowledge on the pathway of RNA targeting into the mitochondria, its mechanisms and regulation, and will allow optimization of the therapeutic strategies based on RNA import. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 9540048 Université de Strasbourg Strasbourg 2019-12-31 https://theses.hal.science/tel-03738062 application/pdf 15524105 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2019/JEANDARD_Damien_2019_ED414.pdf http://www.theses.fr/2019STRAJ005/abes https://theses.hal.science/tel-03738062 https://theses.hal.science/tel-03738062 https://theses.hal.science/tel-03738062 Jeandard Damien 1991-09-17 FR 240310047 https://theses.fr/2019STRAJ005 2019STRAJ005 https://doi.org/10.70675/292f625az9431z45aaz8426z08c82f3bffa3 2019-02-01 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Entelis Nina MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 151894450 Giegé Philippe MADS_PRESIDENT_DU_JURY 152079335 Entelis Nina MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 151894450 Giegé Philippe MADS_MEMBRE_DU_JURY_2 152079335 Barrey Eric MADS_MEMBRE_DU_JURY_3 079446809 Rötig Agnès MADS_MEMBRE_DU_JURY_4 033201218 Barrey Eric MADS_RAPPORTEUR_1 079446809 Rötig Agnès MADS_RAPPORTEUR_2 033201218 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 156502844 Génétique moléculaire, génomique et microbiologie (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 156733447 93783 ddc:570 Entelis Nina Giegé Philippe Entelis Nina Giegé Philippe Barrey Eric Rötig Agnès Barrey Eric Rötig Agnès École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Génétique moléculaire, génomique et microbiologie (Strasbourg) PDF 9540048 confidentialité 2019-02-01 2022-02-01 confidentialité 2019-02-01 2022-02-01 confidentialité 2019-02-01 2022-02-01 confidentialité 2019-02-01 2022-02-01