Note ABES Interaction entre la sous unité V0 de la V-ATPase et le facteur d'échange ARNO et son implication fonctionnelle dans l'exocytose régulée Interaction between the V0 subunit of V-ATPase and the exchange factor ARNO and its functional involvement in regulated exocytosis Acide phosphatidique Cellule neuroendocrine Lipides Phospholipase D Exocytose V-ATPase Exocytosis Lipids Neuroendocrine cell Phosphatidic acid Phospholipase D V-ATPase 572.4 616.8 Système neuro-endocrinien Métabolisme Exocytose ATPases Récepteurs à l'acide phosphatidique Vacuolar Proton-Translocating ATPases Dissertation universitaire Alors que s’accumulent des données épidémiologiques qui suggèrent une importance fondamentale des lipides de l’alimentation dans l’homéostasie cellulaire et le développement de nombreuses pathologies humaines, peu d’informations sur leurs fonctions spécifiques sont disponibles à ce jour. Ceci est particulièrement le cas pour la neurosecrétion qui dépend de la fusion d’organites vésiculaires avec la membrane plasmique. Des études récentes ont montré le rôle clé de la compartimentalisation lipidique au niveau des sites d’exocytose et par ailleurs validées la notion de lipides fusogéniques, comme pour l’acide phosphatidique (PA).La V-ATPase, via ses domaines V0 et V1 est à la fois impliquée dans le remplissage en neurotransmetteurs des vésicules, mais aussi dans leur fusion. Nous montrons ici que V0a1 interagit avec le facteur d’échange pour Arf6 ARNO. En bloquant cette interaction, nous avons observé une réduction de l’activation d’Arf6, de l’activité PLD et de l’exocytose, avec une modification de la cinétique des événements unitaires d’exocytose. Nous proposons que la dissociation de V1 de V0 pourrait représenter un signal permettant l’activation de la voie Arf6-ARNO-PLD1 et ainsi promouvoir la synthèse de PA requise à une exocytose efficace dans les cellules neuroendocrines. Lipids play key cellular functions and are involved in many human diseases and little information is available on their exact function. This is especially the case in neurosecretion that relies on the fusion of specific membrane organelle with the plasma membrane for which relatively little attention has been paid to the necessary role of lipids. Recent studies have established the importance of lipid compartmentalization at the exocytotic sites and validated the contribution of fusogenic lipids such as phosphatidic acid (PA) for membrane fusion. The V-ATPase is involved both in the charging of secretory vesicle and the membrane fusion for secretion of vesicle. Indeed, the V1 and V0 subdomains were shown to dissociate during stimulation allowing subunits of the vesicular V0 to interact with different proteins of the secretory machinery. We show here that V0a1 interacts with the exchange factor ARNO and promotes Arf6 activation during exocytosis in neuroendocrine cells. Interfering with the V0a1-ARNO interaction prevented phospholipase D (PLD) activation, phosphatidic acid synthesis during exocytosis, and altered the kinetic parameters of individual fusion events.We suggest that V1 dissociation from V0 could represent the signal that triggers the activation of the ARNO-Arf6-PLD1 pathway and promotes PA synthesis needed for efficient exocytosis in neuroendocrine cells. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 14611248 Université de Strasbourg Strasbourg 2020-12-31 https://theses.hal.science/tel-03270798 application/pdf 10981951 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2019/Wang_Qili_2019_ED414.pdf http://www.theses.fr/2019STRAJ049/abes https://theses.hal.science/tel-03270798 https://theses.hal.science/tel-03270798 https://theses.hal.science/tel-03270798 Wang Qili 1986-04-13 CN 243382960 https://theses.fr/2019STRAJ049 2019STRAJ049 https://doi.org/10.70675/4f027bbdz0c37z47cfzac58z8dce4ace9d7c 2019-09-18 Neurosciences Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Vitale Nicolas MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 142619957 Simonneaux Valérie MADS_PRESIDENT_DU_JURY 033237778 Vitale Nicolas MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 142619957 Simonneaux Valérie MADS_MEMBRE_DU_JURY_2 033237778 El Far Oussama MADS_MEMBRE_DU_JURY_3 083779736 Olivier Jean-Luc MADS_MEMBRE_DU_JURY_4 068664435 El Far Oussama MADS_RAPPORTEUR_1 083779736 Olivier Jean-Luc MADS_RAPPORTEUR_2 068664435 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 156502844 Institut des neurosciences cellulaires et intégratives (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 157760308 93782 ddc:570 ddc:610 Vitale Nicolas Simonneaux Valérie Vitale Nicolas Simonneaux Valérie El Far Oussama Olivier Jean-Luc El Far Oussama Olivier Jean-Luc École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Institut des neurosciences cellulaires et intégratives (Strasbourg) PDF 14611248 confidentialité 2019-09-18 2020-12-31 confidentialité 2019-09-18 2020-12-31 confidentialité 2019-09-18 2020-12-31 confidentialité 2019-09-18 2020-12-31