Note ABES Implication de l’acide phosphatidique dans le trafic membranaire : rôle et régulation de la phospholipase D au cours de la phagocytose et de l’exocytose régulée Involvment of phosphatidic acid in membrane traffic : role and regulation of phospholipase D during phagocytosis and regulated exocytosis Acide phosphatidique Phospholipase D Trafic Phagocytose Exocytose Lipides Lipids Neuroendocrine cell Exocytosis Phagocytosis Phosphatidic acid Phospholipase D 572.4 572.6 Lipides -- Métabolisme Phospholipases Transport biologique Phagocytose Interactions phospholipide-protéine Récepteurs à l'acide phosphatidique La mise en évidence du rôle des lipides dans le trafic membranaire fait partie des avancées majeures de ces dernières années. Mes travaux de thèse se sont focalisés sur le plus simple des phospholipides, l’acide phosphatidique (PA). La production de PA par la phospholipase D (PLD) joue un rôle crucial au cours de la phagocytose et l’exocytose régulée, mais la dynamique de sa formation, tout comme les mécanismes d’action des différentes formes de PA, restent à ce jour totalement inconnus. Durant mon doctorat, j’ai contribué à la caractérisation de trois domaines de liaison peptidique au PA, qui nous ont permis de mieux comprendre les mécanismes d’interaction des protéines avec le PA et de générer des sondes moléculaires pour repérer ce lipide au sein des cellules. Ainsi, j’ai pu visualiser la production de PA au cours de la phagocytose et mis en évidence l’implication de la GTPase Arf6 dans la régulation de la synthèse de PA par la PLD. J’ai également pu montrer que la PLD est impliquée dans plusieurs étapes de l’exocytose dans des cellules neuroendocrines. Des expériences de lipidomique et de restauration ont révélé notamment que des formes mono- et polyinsaturées du PA contrôlent des étapes distinctes de l’exocytose que j’ai pu définir. The discovery of the involvement of lipids in membrane trafficking is one of the major recent progress in cell biology. My thesis work focused on phosphatidic acid (PA), the simplest phospholipid. PA synthesis by phospholipase D (PLD) plays a crucial role during phagocytosis and regulated exocytosis, but its precise dynamics, as well as the mode of action of the different PA species, remain unknown. I characterized three PA binding domains allowing a better understanding of the interaction between proteins and PA and leading to the generation of genetic sensors for PA in cells. Thus I could visualize PA synthesis during phagocytosis and identified that the small GTPase Arf6 regulates PLD activity and consequently PA synthesis. My work also reveals that PLD modulates several steps during exocytosis in neuroendocrine cells. Further lipidomics and rescue experiments allowed me to show that mono- and polyunsaturated forms of PA are involved in distinct steps of exocytosis. Electronic Thesis or Dissertation Text fr PDF 14226073 Université de Strasbourg Strasbourg 2020-12-31 https://theses.hal.science/tel-02919857 application/pdf 24229030 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2019/Tanguy_Emeline_2019_ED414.pdf http://www.theses.fr/2019STRAJ112/abes https://theses.hal.science/tel-02919857 https://theses.hal.science/tel-02919857 https://theses.hal.science/tel-02919857 Tanguy Emeline 1993-06-02 FR 248587846 https://theses.fr/2019STRAJ112 2019STRAJ112 https://doi.org/10.70675/0eeb3943z19c5z46a0z925ez8a79ca99ba3e 2019-06-18 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Vitale Nicolas MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 142619957 Friant Sylvie MADS_PRESIDENT_DU_JURY 139008217 Vitale Nicolas MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 142619957 Friant Sylvie MADS_MEMBRE_DU_JURY_2 139008217 Niedergang Florence MADS_MEMBRE_DU_JURY_3 108464075 Record Michel MADS_MEMBRE_DU_JURY_4 081313454 Niedergang Florence MADS_RAPPORTEUR_1 108464075 Record Michel MADS_RAPPORTEUR_2 081313454 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 156502844 Institut des neurosciences cellulaires et intégratives (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 157760308 93782 ddc:570 Vitale Nicolas Friant Sylvie Vitale Nicolas Friant Sylvie Niedergang Florence Record Michel Niedergang Florence Record Michel École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Institut des neurosciences cellulaires et intégratives (Strasbourg) PDF 14226073 confidentialité 2019-06-18 2020-01-01 confidentialité 2019-06-18 2020-01-01 confidentialité 2019-06-18 2020-01-01 confidentialité 2019-06-18 2020-01-01