Note ABES Mécanismes moléculaires impliqués dans l'import du fer par la pyoverdine chez Pseudomonas aeruginosa Molecular mechanism involved in iron acquisition by pyoverdin in Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Fer Sidérophores Pyoverdine Pseudomonas aeruginosa Iron Siderophores Pyoverdine 572.8 579.3 Pseudomonas aeruginosa Pathogénicité Sidérophores Fer dans l'organisme Transport biologique Protéines membranaires Pseudomonas aeruginosa est une bactérie pathogène opportuniste provoquant des infections chez des patients dont le système immunitaire est affaibli. Cette bactérie, comme tous les organismes vivants, a besoin de fer pour croître. Paradoxalement, ce nutriment essentiel est peu biodisponible car peu soluble. Pour acquérir le fer, P. aeruginosa synthétise et sécrète entre autres le sidérophore pyoverdine (Pvd). La voie d’import du fer par la Pvd fait intervenir plusieurs acteurs : d’abord les transporteurs de membrane externe, FpvA et FpvB, qui permettent l’import du complexe Pvd-Fer à travers la membrane externe. Arrivé dans le périplasme, le complexe Pvd-Fe interagit avec deux protéines périplasmiques FpvC et FpvF pour former le complexe FpvC-FpvF-Pvd-Fe. Au sein de ce complexe, le fer est réduit par FpvG, une protéine de membrane interne. Cette réduction entraine la dissociation du métal du sidérophore, et une chélation du fer ferreux par FpvC qui le transporte jusqu’à FpvDE, un transporteur ABC, pour la translocation au travers de la membrane interne vers le cytoplasme. La Pvd reste liée à FpvF, qui serait responsable de l’acheminement de la Pvd jusqu’à une pompe d’efflux PvdRTOpmQ pour son recyclage dans le milieu extérieur. Le gène codant pour la protéine FpvG se trouve organisé en opéron avec 3 autres gènes fpvH, fpvJ et fpvK, dont les protéines codées sont de fonctions inconnues, mais essentielles à l’activité́ de FpvG et au mécanisme de dissociation du fer de la Pvd. Différentes approches ont été développés au cours de cette thèse afin d’aller plus loin dans la compréhension des mécanismes moléculaires impliqués l’import du fer par la Pvd. Dans un premier temps, nous avons étudié le réseau d’interactions des protéines impliquées dans la dissociation du complexe Pvd-Fer ainsi que le mécanisme de dissociation du fer de la Pvd. Dans un second temps, nous nous sommes intéressés à la sécrétion de la Pvd et avons tenté d’identifier un second transporteur. Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic human pathogen causing severe infections in immuno- compromised and cystic fibrosis patients. Pyoverdine (Pvd) is the main siderophore secreted by P. aeruginosa to get access to iron, an essential nutrient. Pvd acts as an iron chelator and is also a signal molecule involved in the expression of other virulence factors. Pvd is secreted in the extracellular medium and is then taken back to the cell via a mechanism that involved numerous proteins. In this work, we focused on the interaction network between the proteins involved in iron release from Pvd. We also studied the dissociation mechanism of iron from Pvd. Then, we tried to identify the secretion system involved in Pvd secretion. Electronic Thesis or Dissertation Text fr PDF 17331147 Université de Strasbourg Strasbourg 2021-12-31 https://theses.hal.science/tel-03504318 application/pdf 17197594 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2020/Bonneau_Anne_2020_ED414.pdf http://www.theses.fr/2020STRAJ028/abes https://theses.hal.science/tel-03504318 https://theses.hal.science/tel-03504318 https://theses.hal.science/tel-03504318 https://theses.hal.science/tel-03504318 Bonneau Anne 1994-12-16 FR 259248436 https://theses.fr/2020STRAJ028 2020STRAJ028 https://doi.org/10.70675/50fb2112z8a59z4c17z8b74ze636aa5f28f0 2020-09-23 Sciences de la vie et de la santé Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Schalk Isabelle MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 148937055 Seemann Myriam MADS_PRESIDENT_DU_JURY 148363520 Seemann Myriam MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 148363520 Picard Martin MADS_MEMBRE_DU_JURY_2 099528363 Arnoux Pascal MADS_MEMBRE_DU_JURY_3 08652819X Bleves Sophie MADS_MEMBRE_DU_JURY_4 15014914X Picard Martin MADS_RAPPORTEUR_1 099528363 Arnoux Pascal MADS_RAPPORTEUR_2 08652819X École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 156502844 Biotechnologie et signalisation cellulaire (Strasbourg ; 2011-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 157715205 207563 ddc:570 Schalk Isabelle Seemann Myriam Seemann Myriam Picard Martin Arnoux Pascal Bleves Sophie Picard Martin Arnoux Pascal École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Biotechnologie et signalisation cellulaire (Strasbourg) PDF 17331147