Note ABES Etude biochimique et structurale des complexes MARS de plasmodium Biochemical and structural study of MARS complexes from plasmodium Plasmodium Aminoacyl-ARNt synthétases Complexes MARS Plasmodium Aminoacyl-tRNA synthetases MARS complexes 572.86 616.96 Plasmodies Aminoacyl-ARNt synthétases Paludisme Plasmodium est le parasite qui cause le paludisme. L’équipe a mis en évidence, in vitro, l’import d’ARNt exogène et a identifié un transporteur potentiel : la protéine tRip (tRNA import protein). In vitro, tRip lie tous les ARNt en reconnaissant leur structure. In vivo, tRip est une protéine transmembranaire et son domaine de liaison aux ARNt est exposé à l’extérieur du parasite. tRip n’est pas essentielle, mais la multiplication du parasite KO est significativement ralentie. En plus de son rôle dans l’import d’ARNt, tRip interagit avec 3 aminoacyl-ARNt synthétases : la glutamyl- (ERS), la glutaminyl- (QRS) et la methionyl-ARNt synthétase (MRS), suggérant que tRip permet l’organisation d’un complexe multi synthétasique (MARS) localisé à la membrane. J’ai pu montrer que l’assemblage du complexe est effectué par des domaines GST N-terminales présents dans les 4 partenaires. J’ai identifié, reconstitué et caractérisé 2 complexes distincts : complexe Q (tRip:ERS:QRS) et complexe M (tRip:ERS:MRS). La résolution de la structure cristallographique du GST de l’ERS ainsi que des tests de mutagenèse dirigée m’a permis de proposer des modèles des complexes MARS. Plasmodium is a genus of protozoan parasites causing malaria. The team demonstrated, in vitro, the import of exogenous tRNA and identified a potential transporter: tRip (tRNA import protein). In vitro, tRip binds all tRNAs by recognizing their structure. In vivo, tRip is transmembrane protein and its tRNA binding domain is exposed outside the parasite. tRip is not essential, but its deletion slows down parasite multiplication and protein synthesis. In addition to its role in tRNA import, tRip interacts with 3 aminoacyl-ARNt synthetases: glutamyl- (ERS), glutaminyl- (QRS) and methionyl-ARNt synthetase (MRS), suggesting that tRip allows the organization of a multi tRNA synthetase complex (MARS) localized at the membrane. During my thesis, I demonstrated that assembly of the complex is mediated by GST domains appended to the N-terminus of each partner. I identified, reconstituted and characterize in solution 2 distinct complexes: complex Q (tRip:ERS:QRS) and complex M (tRip:ERS:MRS). The resolution of the crystal structure of ERS GST domain as well as point mutation experiments allowed me to propose a model for these complexes MARS. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 20019337 Université de Strasbourg Strasbourg 2022-12-31 https://theses.hal.science/tel-03615135 application/pdf 9951221 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2020/Jaramillo-Ponce_Jose-Refugio_2020_ED414.pdf http://www.theses.fr/2020STRAJ052/abes https://theses.hal.science/tel-03615135 https://theses.hal.science/tel-03615135 https://theses.hal.science/tel-03615135 https://theses.hal.science/tel-03615135 Jaramillo Ponce José Refugio 1991-04-28 FR 261095854 https://theses.fr/2020STRAJ052 2020STRAJ052 https://doi.org/10.70675/d99d421ezee83z4eeaz88efze0862b93839d 2020-12-04 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Frugier Magali MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 160427703 Becker Hubert MADS_PRESIDENT_DU_JURY 151566704 151566704 Frugier Magali MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 160427703 Becker Hubert MADS_MEMBRE_DU_JURY_2 151566704 151566704 Mirande Marc MADS_MEMBRE_DU_JURY_3 03139342X Crépin Thibaut MADS_MEMBRE_DU_JURY_4 190591625 Mirande Marc MADS_RAPPORTEUR_1 03139342X Crépin Thibaut MADS_RAPPORTEUR_2 190591625 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 156502844 Architecture et réactivité de l'ARN (Strasbourg ; 1992-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 157545687 93780 ddc:570 ddc:610 Frugier Magali Becker Hubert Frugier Magali Becker Hubert Mirande Marc Crépin Thibaut Mirande Marc Crépin Thibaut École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Architecture et réactivité de l'ARN (Strasbourg) PDF 20019337 confidentialité 2020-12-04 2021-12-31 confidentialité 2020-12-04 2021-12-31 restriction 2020-12-04 2021-12-31 confidentialité 2020-12-04 2021-12-31 confidentialité 2020-12-04 2021-12-31