Note ABES Développement d'approches de spectrométrie de masse native et de mobilité ionique de nouvelle génération pour la caractérisation de complexes multiprotéiques et protéines thérapeutiques Development of new methodologies for native mass spectrometry and ion mobility approaches to characterize multiprotein complexes and therapeutic proteins Spectrométrie de masse native Mobilité ionique Collision-induced unfolding Anticorps monoclaux Complexe multiprotéiques Native mass spectrometry Ion mobility Collision-induced unfolding Monoclonal antibodies Multiprotein complexes 543 Chimie analytique Spectrométrie de masse Spectroscopie de mobilité ionique Anticorps Ce travail de thèse porte sur des développements méthodologiques en spectrométrie de masse native (nMS) et mobilité ionique (IMS) afin de mieux répondre aux problématiques rencontrées par les biologistes ou les entreprises biopharmaceutiques. Le couplage de la chromatographie d’exclusion stérique (SEC) à la nMS a d’abord été étendu à une large variété de complexes biologiques. L’intérêt des méthodes de nMS et nIMS-MS pour des études intégratives de biologie structurale a ensuite été montré dans le cas de complexes multiprotéiques de hauts poids moléculaires. D’autre part, l’apport du nouvel instrument cyclique de haute résolution IMS-MS pour la caractérisation d’anticorps monoclonaux (mAbs) par rapport aux instruments IMS-MS de première génération a été évalué. Enfin, les approches de collision-induced unfolding (CIU) ont été automatisées en développant un nouveau couplage de la SEC à la CIU. L’intérêt de la haute résolution CIU pour l’étude des mAbs a également été illustré. This PhD work focuses on methodological developments in native MS (nMS) and ion mobility spectrometry (IMS) to better address problems encountered either by structural biologists or by biopharmaceutical companies. First, the coupling of size exclusion chromatography (SEC) to nMS was extended to a large variety of noncovalent biological complexes. The interest of nMS and nIMS-MS methods for integrative structural biology studies was demonstrated through the analysis of high molecular weight multiprotein complexes. Then, benefits of the new high-resolution cyclic IMS-MS platform and its multifunction capabilities over first-generation IMS-MS instruments were illustrated for the characterization of therapeutic monoclonal antibody (mAb) products. Next, a fully automated collision-induced unfolding (CIU) workflow was developed by coupling SEC to CIU, affording high-throughput CIU of mAbs. Lastly, potentialities of high-resolution CIU approaches were evaluated for in-depth mAb analysis. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 43003791 Université de Strasbourg Strasbourg 2022-12-31 https://theses.hal.science/tel-03934763 application/pdf 42829105 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2021/DESLIGNIERE_Evolene_2021_ED222.pdf http://www.theses.fr/2021STRAF030/abes https://theses.hal.science/tel-03934763 https://theses.hal.science/tel-03934763 https://theses.hal.science/tel-03934763 https://theses.hal.science/tel-03934763 Deslignière Evolène 1995-02-10 FR 262824701 0705012709M 21513081 4200003 https://theses.fr/2021STRAF030 2021STRAF030 https://doi.org/10.70675/a35cc8e9z819dz4401zbc76zaaf3d4934257 2021-12-15 Chimie analytique Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Cianférani-Sanglier Sarah MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 070341222 Van der Rest Guillaume MADS_PRESIDENT_DU_JURY 158188993 Marcoux Julien MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 144270706 Rogniaux Hélène MADS_MEMBRE_DU_JURY_2 197194818 197194818 Van der Rest Guillaume MADS_RAPPORTEUR_1 158188993 Thalassinos Konstantinos MADS_RAPPORTEUR_2 262825279 École doctorale des Sciences chimiques (Strasbourg ; 1995-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 222 156504081 Institut pluridisciplinaire Hubert Curien (Strasbourg ; 2006-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 157760502 93777 ddc:540 Cianferani Sarah Van der Rest Guillaume Marcoux Julien Rogniaux Hélène Van der Rest Guillaume Thalassinos Konstantinos École doctorale Sciences chimiques (Strasbourg ; 1995-....) Institut pluridisciplinaire Hubert Curien (Strasbourg) PDF 43003791 confidentialité 2021-12-15 2022-12-31 confidentialité 2021-12-15 2022-12-31 restriction 2021-12-15 2022-12-31 confidentialité 2021-12-15 2022-12-31 confidentialité 2021-12-15 2022-12-31