Note ABES Role and regulation of UHRF1 ubiquitination in cancer cells Rôle et régulation de l'ubiquitination UHRF1 dans les cellules cancéreuses Epigenetics UHRF1 Tip60 GR Dexamethasone Thymoquinone ROS Polyubiquitination DNA repair Proteasomal degradation Epigenetics UHRF1 Tip60 GR Dexamethasone Thymoquinone ROS Polyubiquitination DNA repair Proteasomal degradation 572.8 616.99 Cancer Cytogénétique ADN Méthylation Ubiquitinylation La méthylation de l'ADN est l'une des marques épigénétiques les plus importantes, impliquée dans de nombreux processus cellulaires physiologiques ainsi que dans des pathologies. La transmission des profils de méthylation de l'ADN de la mère aux cellules filles est assurée au cours de la mitose par l'action du tandem (UHRF1/DNMT1). UHRF1 est impliqué dans l'extinction d'un très grand nombre de gènes suppresseurs de tumeurs par des mécanismes qui restent largement à décrypter. Dans la présente étude, nous nous sommes intéressés au rôle et à la régulation de la poly-ubiquitination d'UHRF1 induite par la thymoquinone, un médicament anticancéreux naturel, connu pour augmenter ou réactiver l'expression des gènes suppresseurs de tumeurs. Nous avons découvert que l'auto-ubiquitination de l'UHRF1, induite par la TQ, est provoquée par des espèces réactives de l'oxygène, et agit suite à des dommages à l'ADN. Nous avons pu démontrer que la forme polyubiquitinylée de UHRF1 est encore capable de réduire au silence le gène suppresseur de tumeur p16INK4A. Cela suggère que c'est la disparition complète de UHRF1, y compris la version poly-ubiquitinylée, qui est nécessaire à la réexpression des gènes suppresseurs de tumeurs. Nous avons pu montrer que la poly-ubiquitination de UHRF1 n'est pas impliquée dans sa dégradation. Nous avons également pu montrer que l'auto-ubiquitination induite par la TQ est médiée par l'activité deTip60. Ce dernier étant connu comme un cofacteur des récepteurs nucléaires, nous avons cherché à savoir si le récepteur des glucocorticoïdes (GR) pouvait être impliqué dans la régulation de l'ubiquitination de UHRF1. L'activation du GR, avec la dexaméthasone, n'a pas influencé l'auto-ubiquitination de l'UHRF1. En revanche, nous avons pu observer que l'UHRF1 contrôle l'expression du GR et que la TQ a induit la down-regulation de ce dernier ainsi que sa poly-ubiquitination. L'analyse par spectroscopie de masse de l'UHRF1 étiqueté FLAG-HA a permis d'identifier des partenaires de l'UHRF1 impliqués dans la réparation de l'ADN et que la TQ augmentait leur association avec l'UHRF1, suggérant que la polyubiquitination de l'UHRF1 est impliquée dans le processus de réparation de l'ADN. DNA methylation is one of the most important epigenetic marks involved in many physiologic cellular processes and pathologies as well. The transmission of DNA methylation patterns from a mother to the daughter cells is ensured during mitosis through the action of the Ubiquitin-like, containing PHD and RING domains, 1/DNA methyltransferase 1(UHRF1/DNMT1) tandem. UHRF1 is involved in the silencing of a huge number of tumor suppressor genes via mechanisms that remains largely to be deciphered. In the present study, we were interested in the role and regulation of UHRF1 poly-ubiquitination induced by thymoquinone a natural anti-cancer drug, known to enhance or re-activate the expression of tumor suppressor genes. We found that the auto-ubiquitination of UHRF1, induced by TQ, is induced by reactive oxygen species, and acts as a result of DNA damage. We could demonstrate that the poly-ubiquitinated form of UHRF1 is still able to silence the tumor suppressor gene p16INK4A. This suggests that it is the complete disappearance of UHRF1 including the poly-ubiquitinated version that is required for re-expression of tumor suppressor genes. We could show that UHRF1 poly-ubiquitination is not involved in its degradation. We could further show that TQ induced autoubiquitinationis mediated via the activity of Tip60. As this latter is known as a nuclear receptor co-factor, we investigated if the glucocorticoid receptor (GR) might be involved in the regulation of UHRF1 ubiquitination. Activation of the GR,with dexamethasone, did not influence auto-ubiquitination of UHRF1. In contrast, we could observe that UHRF1 controls expression of GR and that TQ induced the down-regulation of this latter as well as its poly-ubiquitination. Mass spectroscopy analysis of FLAG-HA-tagged UHRF1 identified UHRF1 partners involved in DNA repair and that TQ increased their association with UHRF1, suggesting that poly-ubiquitination of UHRF1 is involved in DNA repair process. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 13456918 Université de Strasbourg Strasbourg 2023-12-31 https://theses.hal.science/tel-05580669 application/pdf 13601510 http://www.theses.fr/2022STRAJ007/document http://www.theses.fr/2022STRAJ007/abes https://theses.hal.science/tel-05580669 Almalki Naif 1989-11-20 FR 265899125 0EFB1T00CE6 21803439 4200047 https://theses.fr/2022STRAJ007 2022STRAJ007 https://doi.org/10.70675/22c92e41zc43bz4220zb031zf805ff86b739 2022-03-01 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Bronner Christian MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 110351827 Boucher Philippe MADS_PRESIDENT_DU_JURY 127429379 Rocquigny Hugues de MADS_RAPPORTEUR_1 129525073 Bueb Jean-Luc MADS_RAPPORTEUR_2 134079833 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 414 156502844 Institut de génétique et de biologie moléculaire et cellulaire (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 155263749 93800 ddc:570 ddc:610 Bronner Christian Boucher Philippe Rocquigny Hugues de Bueb Jean-Luc École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Institut de génétique et de biologie moléculaire et cellulaire (Strasbourg) PDF 13456918 confidentialité 2022-03-01 2025-12-31 confidentialité 2022-03-01 2025-12-31 restriction 2022-03-01 2025-12-31 confidentialité 2022-03-01 2025-12-31 confidentialité 2022-03-01 2025-12-31