Note ABES Étude de la biogenèse et des fonctions des petits ARN non codants dérivant d'ARN de transfert chez Arabidopsis thaliana Study of biogenesis and functions of tRNA derived small non-coding RNA in Arabidopsis thaliana ARNt TRF RNase T2 RNS Hélicase DExH1 G-quadruplex TRNA TRF RNase T2 RNS Helicase DExH1 G-quadruplex 572.8 571.2 ARN de transfert ARN non codants Arabidopsis thaliana Les petits ARN non codants dérivant des ARN de transfert (tRFs) ont été identifiés dans tous les domaines de la vie et sont impliqués dans des mécanismes biologiques variés. Mon travail de thèse, mené sur la plante modèle Arabidopsis thaliana, a eu pour but de mieux comprendre la biogenèse des tRFs et leurs fonctions chez les plantes. Des lignées stables n’exprimant pas les trois principales RNases T2, RNS1, 2 et 3, acteurs majeurs de la biogenèse des tRFs, ont été réalisées avec la technologie CRISPR/Cas9. De plus, le tRF-5D Ala (AGC) de 20 nucléotides, montré précédemment comme inhibant la traduction in vitro, a été utilisé comme modèle pour déterminer sa fonction. Des protoplastes d’A. thaliana ont été transfectés avec ce tRF pour observer sa localisation subcellulaire et identifier ses partenaires protéiques. Celui-ci est retrouvé accumulé dans des foci cytosoliques qui ne s’apparentent pas à des mitochondries, P-bodies ou granules de stress. Une hélicase ARN,DExH1, interagissant avec des G-quadruplex, a été retrouvée associée avec le tRF Ala et la présence de structure en G-quadruplex sur le tRF Ala a été confirmée in vitro. Les résultats obtenus suggèrent que le tRF Ala structuré en G-quadruplex peut être stocké dans la cellule et que DExH1 interviendrait pour le relâcher sous forme non structurée. Small non-coding RNA derived from transfer RNAs (tRFs) have been identified in all domains of life and are implicated in various biological process. Based on the Arabidopsis thaliana model plant, my thesis work aimed to contributed to the understanding of tRFs biogenesis and their functions in plants. Stable knock out lines of the three main RNases T2, RNS1, 2,and 3, the main actors of tRFs biogenesis, were created with CRISPR/Cas9 technology. In addition, the tRF-5D Ala (AGC) of 20 nucleotides, previously shown to inhibit translation in vitro, was used as a model to determine its function. A. thaliana protoplasts were transfected with this tRF to determine its subcellular localization and to identify its protein partners. The tRF Ala is found accumulated in cytosolic foci that are neither mitochondria, P-bodies nor stress granules. Additionally, the tRF Ala that we showed able to create G-quadruplex in vitro, associates with DExH1, an RNA helicase interacting with G-quadruplex. These results suggest that the tRF Ala, structured in G-quadruplex, can be stored in the cell and that DExH1 would release it in an unstructured form. Electronic Thesis or Dissertation Text fr PDF 8154331 Université de Strasbourg Strasbourg 2022-12-31 https://theses.hal.science/tel-04213545 application/pdf 24095496 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2022/CHERY_Marjorie_2022_ED414.pdf http://www.theses.fr/2022STRAJ034/abes https://theses.hal.science/tel-04213545 https://theses.hal.science/tel-04213545 https://theses.hal.science/tel-04213545 https://theses.hal.science/tel-04213545 Chery Marjorie 1995-08-13 FR 265782910 1506020972T 21818875 4200047 https://theses.fr/2022STRAJ034 2022STRAJ034 https://doi.org/10.70675/35a8517ez16e9z4f11z9b7fz2ade71f22e7c 2022-06-29 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Drouard Laurence MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 060734949 Remacle Claire MADS_PRESIDENT_DU_JURY 163940762 Lelandais-Brière Christine MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 073427055 Gagliardi Dominique MADS_MEMBRE_DU_JURY_2 129248444 Remacle Claire MADS_RAPPORTEUR_1 163940762 Merret Rémy MADS_RAPPORTEUR_2 151183899 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 414 156502844 Institut de biologie moléculaire des plantes (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 156775727 444 ddc:570 Drouard Laurence Remacle Claire Lelandais-Brière Christine Gagliardi Dominique Remacle Claire Merret Rémy École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Institut de biologie moléculaire des plantes (Strasbourg) PDF 8154331 confidentialité 2022-06-29 2023-06-28 confidentialité 2022-06-29 2023-06-28 confidentialité 2022-06-29 2023-06-28 confidentialité 2022-06-29 2023-06-28