Note ABES Characterization of protein-protein interactions mediated by the IKK complex Caractérisation des mécanismes d’interaction de la kinase IKK avec ses substrats cellulaires Interaction protéique IKK complexe NF-κB IκBα Inflammation Système immunitaire Cancer Protein interaction IKK complex NF-κB IκBα Inflammation Immune system Cancer 571.96 572.6 Réponse immunitaire Inhibiteurs des protéines kinases Mécanisme d'action Inflammation L'inhibiteur de la kinase κB (IKK) est le régulateur principal de la signalisation du NF-κB, impliqué dans l'activation et la régulation de l’inflammatoires et de la réponse immunitaire innée. Lors de la stimulation des récepteurs, IKK induit la translocation des facteurs NF-κB dans le noyau où ils régulent l'expression des gènes. Les espèces du complexe IKK régulant NF-κB sont le canonique (IKK1/IKK2/NEMO) et le complexe alternatif (IKK12). Les informations sur la structure soient disponibles pour les sous-unités IKK mais les détails sur les mécanismes d'interactions IKK-substrat fait défaut. Nous avons identifié un nouveau motif d’amarrage, qui est basé sur le consensus YDDΦXΦ et qui est présent dans l'extrémité C-terminale désordonnée de IκBα. Ce motif est nécessaire et suffisant pour les interactions de IκBα avec les sous-unités IKK1 et 2. Une corrélation directe entre l'affinité de l'interaction du motif et l'activité kinase d’IKK2 est observée. Nous fournissons également un modèle structural 3D de cette interaction basé sur la diffraction aux rayons X et des données de spectrométrie de masse. Le motif YDDΦXΦ est également présent dans d'autres substrats d’IKK (IκBβ, p100 et IRF7). De plus, tests préliminaires montrent que ce motif est également reconnu par la sous-unité régulatrice NEMO. Enfin, les peptides synthétiques contenant le motif YDDΦXΦ sont capables d'inhiber la phosphorylation du substrat par IKK2, ouvrant la voie au développement futur d'une nouvelle classe d'inhibiteurs sélectifs d'IKK. The inhibitor of kB kinase (IKK) is the master regulator of NF-κB signalling and plays a fundamental role in the activation and regulation of inflammatory processes and innate immune response. Upon receptor stimulation, IKK induces the translocation of NF-κB factors into the nucleus where they regulate gene expression. The IKK kinase complex is represented by the canonical complex (IKK1/IKK2/NEMO) and the alternative complex (IKK12). Although structural information is available for IKK1/2, detailed knowledge of the mechanisms of IKK- substrate interactions is lacking. In this work, we have identified a novel YDDΦXΦ docking motif present in the disordered C-terminus of IκBα . This motif is necessary for the interactions with IKK1 and IKK2. A direct correlation between the affinity of the YDDΦXΦ docking interaction and IKK2 kinase activity is observed. We provide a 3D structural model of this interaction based on x-ray diffraction and X-linking mass spectrometry data. The YDDΦXΦ motif is found in other IKK substrates ((IκBβ, p100 and IRF7). Moreover, preliminary analyses indicate that this motif is recognized by the NEMO regulatory subunit. Finally, synthetic peptides containing the YDDΦXΦ motif are able to inhibit substrate phosphorylation by IKK2, opening the way to future development of a new class of selective IKK inhibitors. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 28417705 Université de Strasbourg Strasbourg 2022-12-31 https://theses.hal.science/tel-04563658 application/pdf 28441095 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/MORO_Stefano_2022_ED414.pdf http://www.theses.fr/2022STRAJ037/abes https://theses.hal.science/tel-04563658 https://theses.hal.science/tel-04563658 https://theses.hal.science/tel-04563658 Moro Stefano 1988-03-09 FR 26561239X 0EFB1T06371 21824258 4200047 https://theses.fr/2022STRAJ037 2022STRAJ037 https://doi.org/10.70675/340a028ezd105z4e02z83b4z27f3cd5ea5eb 2022-04-06 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Zanier Katia MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 236279076 Agou Fabrice MADS_PRESIDENT_DU_JURY 17045584X Donzeau Mariel MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 257589724 Agou Fabrice MADS_RAPPORTEUR_1 17045584X Wolff Nicolas MADS_RAPPORTEUR_2 076109976 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 414 156502844 Biotechnologie et signalisation cellulaire (Strasbourg ; 2011-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 157715205 207563 ddc:570 Zanier Katia Agou Fabrice Donzeau Mariel Agou Fabrice Wolff Nicolas École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Biotechnologie et signalisation cellulaire (Strasbourg ; 2011-....) PDF 28417705 confidentialité 2022-04-06 2024-04-06 confidentialité 2022-04-06 2024-04-06 restriction 2022-04-06 2023-04-30 confidentialité 2022-04-06 2024-04-06 confidentialité 2022-04-06 2024-04-06