Note ABES Study of the biological function of TRIM66 protein in spermatogenesis and reproduction Étude de la fonction biologique de la protéine TRIM66 dans la spermiogénèse et la reproduction TRIM66 Spermiogenèse Histone 3 Méthylation Fertilité TRIM66 Spermiogenesis Histone 3 Methylation Fertility 571.8 572.6 Protéines -- Modifications posttraductionnelles Interactions ADN-protéine Spermatogenèse Hétérochromatine TRIM66 est un membre de la famille de protéines TIF1 composée de TRIM24, TRIM28 et TRIM33, qui ont un domaine tandem PHD-bromodomaine en C-terminal. TRIM66 est le membre le moins étudié de cette famille et montre une haute spécificité vers l'expression dans la lignée germinale mâle, spécifiquement dans la population de cellules testiculaires haploïdes appelées spermatides. Le processus de maturation des spermatozoïdes dans les cellules haploïdes est appelé spermiogenèse et au cours de ce processus, un remodelage majeur de la chromatine a lieu avec le remplacement des histones canoniques par des protamines, ce qui se produit également au moment du pic d'expression de TRIM66 dans le testicule. L'impact de TRIM66 sur la maturation des spermatozoïdes pendant la spermiogenèse dans le testicule est inconnu. Dans ce travail, j'ai caractérisé la fonction possible du TRIM66 en utilisant deux modèles de souris. J'ai découvert que TRIM66, bien qu'il soit exprimé dans les spermatides, n'a pas d'impact sur les capacités de fertilisation des spermatozoïdes, mais qu'il affecte le poids de la progéniture à la naissance. L'analyse du transcriptome a révélé que les gènes régulés à la hausse dans la population de spermatides isolées appartiennent aux gènes principalement impliqués dans la voie de méthylation de la lysine 4 de l'histone 3. De plus, les essais de liaison in vitro montrent que le bromodomaine PHD se lie à l'histone H3 uniquement lorsque la lysine 4 est non méthylée. Dans l'ensemble, mes résultats ont révélé un effet paternel pour la perte de fonction de Trim66 qui est probablement causé par le rôle de TRIM66 dans la régulation de H3K4me3 dans les spermatides. TRIM66 is a member of the TIF1 protein family composed of TRIM24, TRIM28 and TRIM33, that have a C-terminus tandem domain PHD-bromodomain. TRIM66 is the least studied member of this family and shows high specificity towards expression in the male germline, specifically in the haploid testis cell population called spermatids. The process of sperm maturation in haploid cells is called spermiogenesis and during this process a major chromatin remodeling takes place with replacement of canonical histones to protamines which happens also during the peak of the expression of TRIM66 in the testis. The impact of TRIM66 on the sperm maturation during spermiogenesis in the testis is unknown. In this work, I characterized the possible function of the TRIM66 by using two mouse models. I found that TRIM66 despite being expressed in spermatids does not impact the sperm fertilization capabilities, however it affects the weight of progeny. The analysis of transcriptome revealed that the upregulated genes in the isolated spermatids population belong to the genes predominantly involved in histone 3 lysine 4 methylation pathway. Furthermore, in vitro binding assays show that the PHD-bromodomain binds to histone H3 only when lysine 4 is unmethylated. All together, my results revealed a paternal effect for Trim66 loss-of-function that is likely caused by TRIM66’s role in H3K4me3 regulation in spermatids. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 38539336 Université de Strasbourg Strasbourg 2023-12-31 application/pdf 15071020 http://www.theses.fr/2022STRAJ077/document http://www.theses.fr/2022STRAJ077/abes Mielnicka Monika 1991-01-11 FR 266474276 https://theses.fr/2022STRAJ077 2022STRAJ077 https://doi.org/10.70675/2cef610fzc802z4a58z8fd0z7675761c05e5 2022-07-22 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Weber Michaël MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 078857430 Boulard Matthieu MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_2 125306989 Ghyselinck Norbert MADS_PRESIDENT_DU_JURY 109217209 Khochbin Saadi MADS_RAPPORTEUR_1 065127188 Cammas Florence MADS_RAPPORTEUR_2 138944814 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 156502844 Biotechnologie et signalisation cellulaire (Strasbourg ; 2011-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 157715205 207563 ddc:570 Weber Michaël Boulard Matthieu Ghyselinck Norbert Khochbin Saadi Cammas Florence École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Biotechnologie et signalisation cellulaire (Strasbourg ; 2011-....) PDF 38539336 confidentialité 2022-07-22 2027-01-01 confidentialité 2022-07-22 2027-01-01 restriction 2022-07-22 2027-01-01 confidentialité 2022-07-22 2027-01-01 confidentialité 2022-07-22 2027-01-01