Note ABES Identification and characterization of Nanobodies directed against four major grapevine viruses : a prospect for antiviral control Identification et caractérisation des Nanobodies dirigés contre quatre virus majeurs de la vigne : une perspective pour la lutte antivirale Nanobody Anticorps simple chaîne Yeast Surface Display GFLV GLRaV-3 GPGV ArMV Nanobody Single-domain antibody Yeast Surface Display GFLV GLRaV-3 GPGV ArMV 571.2 581.3 Vigne Viroses Vigne Résistance aux maladies Anticorps à domaine unique La vigne (Vitis) est sujette à de très nombreuses viroses causant des symptômes qui, en touchant à la vitalité de la plante ou aux fruits produits impactent lourdement la viticulture mondiale. Ces maladies sont causées notamment par le Grapevine Fanleaf Virus (GFLV), l’Arabis Mosaic Virus, le Grapevine Leafroll-associated Virus 3 (GLRaV-3) ou encore le Grapevine Pinot Gris Virus (GPGV). Pour la vaste majorité d’entre eux, il n’existe pas de résistance naturelle dans le matériel génétique. Toutefois, les Nanobodies (Nb), des petits peptides dérivés des parties variables des chaînes lourdes d’immunoglobuline sont capable d’induire de la résistance in planta contre le GFLV. Toutefois celle-ci demeure contournables par des variants du phytovirus. Afin d’améliorer cette résistance et de l’étendre à d’autres cibles, j’ai caractérisé des collections de Nbs dirigés contre le GFLV et l’ArMV afin de trouver des Nbs avec des propriétés intéressantes pour l’expression in planta. En fusionnant divers Nbs dirigés contre le GFLV et l’ArMV, j’ai aussi pu pyramider et diversifier la résistance tout en limitant le nombre de transgènes insérés. Enfin, j’ai mis au point le FLOP-YD pour FLuOrescent-Protein based Yeast Display, un nouveau système qui permet de sélectionner des Nbs contre des phytovirus difficiles à produire. Ainsi j’ai pu isoler et caractériser des Nbs dirigés contre le GLRaV-3 et le GPGV. Grapevine (Vitis) is exposed to numerous viruses causing symptoms that, by affecting the vitality of the plant or the fruits produced, have a heavy impact on viticulture worldwide. These diseases are caused by Grapevine Fanleaf Virus (GFLV), Arabis Mosaic Virus, Grapevine Leafroll-associated Virus 3 (GLRaV-3) or Grapevine Pinot Gris Virus (GPGV). For the vast majority of them, there is no natural resistance in grapevine germplasm. However, Nanobodies (Nb), small peptides derived from the variable parts of immunoglobulin heavy chains, can mediate in planta resistance against GFLV. However, this resistance can be bypassed by variants of the phytovirus.To improve this resistance and to extend it to other targets, I characterized collections of Nbs directed against GFLV and ArMV to find Nbs with interesting properties for better in planta expression and affinity for GFLV. By fusing various Nbs directed against GFLV and ArMV, I also managed to pyramid and diversify resistance while limiting the number of inserted transgenes. Finally, I developed FLOP-YD for FLuOrescent -Protein based Yeast Display, a new, simple Yeast Surface Display system to select Nbs against hard to produce phytoviruses. As a result, I isolated and characterized several Nbs directed against GLRaV-3 and GPGV. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 133711175 Université de Strasbourg Strasbourg 2023-12-31 https://theses.hal.science/tel-05014988 application/pdf 163128988 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2022/COUSIN_Anne_2022_ED414.pdf http://www.theses.fr/2022STRAJ125/abes https://theses.hal.science/tel-05014988 https://theses.hal.science/tel-05014988 Cousin Anne 1994-06-24 FR 270849084 1205000803G 21503554 4200047 https://theses.fr/2022STRAJ125 2022STRAJ125 https://doi.org/10.70675/44a9fde2z7a98z4632z91b3zdbf08567388c 2022-12-20 Biotechnologies Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Ritzenthaler Christophe MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 112137180 Friant Sylvie MADS_PRESIDENT_DU_JURY 139008217 Hust Michael MADS_RAPPORTEUR_1 22709347X Bucher Étienne MADS_RAPPORTEUR_2 202996905 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 414 156502844 Institut de biologie moléculaire des plantes (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 156775727 444 ddc:570 ddc:580 Ritzenthaler Christophe Friant Sylvie Hust Michael Bucher Étienne École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Institut de biologie moléculaire des plantes (Strasbourg) PDF 133711175 confidentialité 2022-12-20 2025-01-01 confidentialité 2022-12-20 2025-01-01 restriction 2022-12-20 2025-01-01 confidentialité 2022-12-20 2025-01-01 confidentialité 2022-12-20 2025-01-01