Note ABES Study of the photophysical properties of an intermolecular Dark-RET system and its application in fast DNA-PAINT superresolution microscopy Étude des propriétés photophysiques d'un système intermoléculaire Dark-RET et son application en microscopie rapide à superrésolution DNA-PAINT Chromophore fluorogène Dark-RET Microscopie à super-résolution DNA-PAINT Fluorogenic chromophore Dark-RET Super-resolution microscopy DNA-PAINT 530 571.4 Transfert d'énergie entre molécules fluorescentes Chromophores Microscopie à super-résolution Le transfert d'énergie par résonance sombre (DRET) est un mécanisme de transfert d'énergie utilisant un donneur "sombre". L’objet de cette thèse était d'étudier les caractéristiques photophysiques d'un système DRET intermoléculaire utilisant un substitut de nucléobase DiethylaminoFluroreneKetotriazolyl (X) comme donneur "sombre" et de l'appliquer à l'imagerie de super-résolution DNA-PAINT. La nature fluorogène et le grand « Stokes shift » de X sont une avancée par rapport aux colorants Förster-RET. L'évolution de la DRET en fonction de la distance entre X et l'accepteur Cy5 dans les duplex d'ADN montre une nature oscillante corrélée à l'orientation relative entre X et Cy5. La dépolarisation induite par le transfert d'énergie mesurée par l'anisotropie montre une nature oscillante similaire. La mise en œuvre du DRET pour la microscopie de super-résolution DNA-PAINT a montré un fort potentiel de cette approche en obtenant des images de super-résolution de microtubules cellulaires en moins de 30 s. Dark resonance energy transfer (DRET) is an energy transfer mechanism using a quenched "dark" donor. The aim of this thesis was to study the photophysical characteristics of an intermolecular DRET system using the nucleobase substitute DiethylaminoFluroreneKetotriazolyl (X) as a "dark" donor, and to apply it to DNA-PAINT super-resolution imaging. The fluorogenic nature and high "Stokes shift" of X represent an advancement over Förster-RET dyes.The evolution of DRET as a function of the distance between X and the Cy5 acceptor in DNA duplexes shows an oscillating nature correlated to the relative orientation between X and Cy5. The energy transfer induced depolarization measured by anisotropy shows a similar oscillating nature.The implementation of DRET on the DNA-PAINT super-resolution microscopy demonstrated the great potential of this new approach, obtaining super-resolution images of cellular microtubules in less than 30 s. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 13356807 Université de Strasbourg Strasbourg 2023-12-31 application/pdf 13260797 http://www.theses.fr/2023STRAJ019/document http://www.theses.fr/2023STRAJ019/abes Ghosh Srijayee 1995-09-03 FR 271576766 0EFB1U05602 21921268 4200002 https://theses.fr/2023STRAJ019 2023STRAJ019 https://doi.org/10.70675/22d4cfd9z6891z466az96f9z887d88740881 2023-07-03 Biophysique et biologie structurale Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Mély Yves MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 031370128 Léonard Jérémie MADS_PRESIDENT_DU_JURY 089269233 Brasselet Sophie MADS_RAPPORTEUR_1 155159615 Sauer Markus MADS_RAPPORTEUR_2 192762311 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 414 156502844 Laboratoire de bioimagerie et pathologies (Strasbourg ; 2018-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 230334857 543258 ddc:530 ddc:570 Mély Yves Léonard Jérémie Brasselet Sophie Sauer Markus École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Laboratoire de bioimagerie et pathologies (Strasbourg) PDF 13356807 confidentialité 2023-07-03 2026-07-03 confidentialité 2023-07-03 2026-07-03 restriction 2023-07-03 2026-07-03 confidentialité 2023-07-03 2026-07-03 confidentialité 2023-07-03 2026-07-03