Note ABES La métalloenzyme IspH, une source pour la découverte de nouveaux agents antimicrobiens IspH metalloenzyme, as a source for the discovery of novel antimicrobials IspH Métalloenzyme Voie du méthylérythritol phosphate (la voie du MEP) Inhibition enzymatique Résistance aux antimicrobiens IspH Metalloenzyme Methylerythritol phosphate pathway (MEP pathway) Enzyme Inhibition Antimicrobial resistance 572 Biochimie Métalloenzymes L'un des moyens de lutter contre la résistance aux antimicrobiens est de se concentrer sur des séries d'enzymes cibles sous-exploitées. Dans la plupart des bactéries et certains parasites, les précurseurs isoprénoïdes sont synthétisés par la voie du 2C-méthyl-d-érythritol 4-phosphate (MEP), absente chez l'homme, et qui représente donc une cible intéressante pour le développement de nouveaux anti-infectieux. IspH est une oxydoréductase contenant un cluster [4Fe-4S]2+ sensible à l'oxygène qui catalyse la dernière étape de la voie du MEP en convertissant l’HMBPP en IPP et DMAPP. Une stratégie pluridisciplinaire a été appliquée pour découvrir de nouvelles classes d'inhibiteurs contre l'IspH de Pseudomonas aeruginosa, Mycobacterium tuberculosis et Plasmodium falciparum. Une méthode a été mise au point pour produire les différents orthologues de l'IspH sous forme d'holoenzymes, suivie par le développement d'un test enzymatique qui a été utilisé pour un criblage in vitro de différentes chimiothèques. Cette dernière a conduit à la découverte d'un puissant nouvel inhibiteur ciblant les trois orthologues. En outre, une approche de prodrogue a été exploitée pour un inhibiteur d'IspH d'E. coli déjà connu ((E)-4-amino-3-méthylbut-2-en-1-yl diphosphate) dans le but d'obtenir une activité antibactérienne, antituberculeuse et antipaludéenne. One way to tackle the arising antimicrobial resistance is to focus on underexploited series of target enzymes. In most bacteria and some parasites, the isoprenoid precursors are synthesized via the 2C-methyl-d-erythritol 4-phosphate (MEP) pathway, which is absent in humans, and it thus represents an interesting target for the development of novel anti-infectives. IspH is an oxidoreductase containing an oxygen-sensitive [4Fe-4S]2+ cluster that catalyzes the last step of the MEP pathway converting HMBPP into IPP and DMAPP. A multidisciplinary strategy has been applied for the discovery of new classes of inhibitors against IspH from Pseudomonas aeruginosa, Mycobacterium tuberculosis and Plasmodium falciparum. A method was developed to produce the IspH orthologs as holoenzymes, followed by the development of the enzymatic assay which was used for an in vitro screening campaign of different chemical libraries. The latter led to the discovery of a novel potent inhibitor targeting the three orthologs object of this study. Moreover, a prodrug approach has been exploited for an already known E. coli IspH inhibitor ((E)-4-amino-3-methylbut-2-en-1-yl diphosphate) with the goal of reaching antibacterial, antitubercular, and antimalarial activity. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 46671024 Université de Strasbourg Strasbourg 2024-12-31 application/pdf 46689049 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2024/Bianchino_Gabriella_2024_ED222.pdf http://www.theses.fr/2024STRAF016/abes Bianchino Gabriella ines 1995-07-24 IT 279917988 0EFB1V04TE4 22022842 4200003 https://theses.fr/2024STRAF016 2024STRAF016 https://doi.org/10.70675/f997a106z4fabz4be6za8daza19fd3c3203c 2024-05-14 Chimie biologique et thérapeutique Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Seemann Myriam MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 148363520 Mislin Gaëtan L. A. MADS_PRESIDENT_DU_JURY 100935141 Cavazza Christine MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 180177125 Ollagnier-De Choudens Sandrine MADS_RAPPORTEUR_1 138476624 Behr Jean-Bernard MADS_RAPPORTEUR_2 079949320 École doctorale des Sciences chimiques (Strasbourg ; 1995-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 156504081 Institut de chimie (Strasbourg ; 2005-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 93761 15677738X ddc:570 Seemann Myriam Mislin Gaëtan L.A. Cavazza Christine Ollagnier-De Choudens Sandrine Behr Jean-Bernard École doctorale des Sciences chimiques (Strasbourg ; 1995-....) Institut de chimie (Strasbourg ; 2005-....) PDF 46671024 confidentialité 2024-05-14 2027-05-30 confidentialité 2024-05-14 2027-05-30 restriction 2024-05-14 2026-05-30 confidentialité 2024-05-14 2027-05-30 confidentialité 2024-05-14 2027-05-30