Note ABES Structure of mitotic chromosome and the role of condensin protein in the structural organization of chromosomes Structure du chromosome mitotique et rôle de la protéine condensine dans l'organisation structurelle des chromosomes Mitose Condensine Cryo-CLEM Cryo-ET Mitosis Condensin Cryo-CLEM Cryo-ET 571.6 572.8 Chromatine Condensine Mitose Interactions ADN-protéine Au cours de la mitose, la chromatine interphasique subit une compaction massive en structures en forme de bâtonnets. Les condensines sont des complexes protéiques dont on sait qu'ils jouent un rôle majeur dans l'organisation des chromosomes mitotiques. Les eucaryotes possèdent deux complexes de condensines conservés, à savoir les condensines 1 et 2. Des études in vitro sur des modèles d'ADN nus montrent que les condensines ont une activité d'extrusion de boucles dans l'organisation des chromosomes. Cependant, il reste encore beaucoup à explorer en ce qui concerne l'étude de la fonction des condensines dans l'environnement encombré de la chromatine. Nous avons utilisé la technologie halo tag où le domaine SMC2 des condensines est marqué par fluorescence à l'aide d'un ligand halo TMR. Cette approche nous aide à localiser les régions riches en condensines dans les chromosomes mitotiques partiellement décondensés en utilisant la cryo-microscopie en lumière à l'intérieur des chromosomes vitrifiés pour les études de cryo-tomographie électronique. Nos tomographies montrent les complexes de condensine dans l'environnement chromatinien. Cela ouvre une fenêtre sur l'étude de l'activité de liaison à l'ADN de la condensine, l'oligomérisation ou le regroupement de la condensine et son interaction avec d'autres composants non histoniques des chromosomes mitotiques. During mitosis, the interphase chromatin undergoes a massive round of compaction into rod-shaped structures. Condensins are protein complexes that have been known to play a major role in mitotic chromosome organization. Eukaryotes have two conserved condensin complexes, namely condensin 1 and 2. In vitro studies on naked DNA templates show evidence for loop extrusion activity of condensins in chromosome organization. However, there is still a lot to explore regarding the study of condensin function inside the crowded chromatin environment. We have used halo tag technology where the SMC2 domain of condensins is tagged to fluorescently label using a halo TMR ligand. This approach helps us to locate condensin-rich regions in partially decondensed mitotic chromosomes using cryo-light microscopy inside the vitrified chromosomes for cryo-electron tomography studies. Our tomograms show condensin complexes inside the chromatin environment. This opens up a window into the study of DNA binding activity of condensin, the oligomerization or clustering of condensin and its interaction with other non-histone components of mitotic chromosomes. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 46837861 Université de Strasbourg Strasbourg 2024-12-31 https://theses.hal.science/tel-05679181 application/pdf 99555450 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2024/PATRA_Gurudatt_2024_ED414.pdf https://theses.fr/2024STRAJ020/abes https://theses.hal.science/tel-05679181 Patra Gurudatt 1994-09-08 FR 280117833 203186255DD 22024475 4200047 https://theses.fr/2024STRAJ020 2024STRAJ020 https://doi.org/10.70675/7aa5c1b1z8706z4abez85e7z1aa27e0757c5 2024-06-28 Aspects moléculaire et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Eltsov Mikhail MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 264612922 Romier Christophe MADS_PRESIDENT_DU_JURY 161229859 161229859 Gutsche Irina MADS_RAPPORTEUR_1 194301680 Prigent Claude MADS_RAPPORTEUR_2 057242747 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 414 156502844 Institut de génétique et de biologie moléculaire et cellulaire (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 155263749 93800 ddc:570 Eltsov Mikhail Romier Christophe Gutsche Irina Prigent Claude École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Institut de génétique et de biologie moléculaire et cellulaire (Strasbourg) PDF 46837861 confidentialité 2024-06-28 2026-06-28 confidentialité 2024-06-28 2026-06-28 confidentialité 2024-06-28 2026-06-28 confidentialité 2024-06-28 2026-06-28