Note ABES Structural and functional study of CPSF6 in HIV-1 nuclear import Étude structurale et fonctionnelle de CPSF6 dans l'import nucléaire du VIH-1 HIV-1 Import nucléaire CPSF6 Capside HIV-1 Nuclear import CPSF6 Capsid 579.2 572.6 571.4 VIH (virus) Aspect moléculaire Protéines virales Enveloppe nucléaire L'interaction du complexe CPSF5/CPSF6 avec les complexes CA du VIH-1 a été étudiée par cristallographie et cryoEM. Nos résultats montrent que CPSF5 forme un complexe étroit avec CPSF6 in vitro, ce qui peut expliquer le co-recrutement du CPSF5 avec le CPSF6 par le VIH-1 dans les noyaux cellulaires. Des méthodes d'assemblage des complexes CA, de purification de CPSF5/CPSF6 et de purification de la capside virale native ont été développées. CPSF5/CPSF6 peut désassembler la tige CA hyperstable in vitro. CPSF5/CPSF6 forme des complexes avec la tige CA et la capside virale. Nous avons obtenu des structures préliminaires de CPSF5/CPSF6 complexé avec le bâtonnet de CA et avec la capside virale par cryoEM. Nos résultats indiquent que la surexpression de l'isoforme 1 ou de l'isoforme 2 de CPSF5/ CPSF6 dans les cellules HEK293T entraîne une réduction de l'infectivité du VIH-1. D'autres études sont nécessaires pour élucider l'impact de CPSF5/CPSF6 sur l'import et le désassemblage nucléaire du VIH-1. The interaction of the CPSF5/CPSF6 complex with HIV-1 CA complexes was studied using X-ray crystallography and cryo-EM. Our results show that CPSF5 forms a tight complex with CPSF6 in vitro, which can explain the co-recruitment of CPSF5 with CPSF6 by HIV-1 in cell nuclei. Methods for the assembly of CA complexes, the purification of CPSF5/CPSF6 and the purification of the native viral core have been developed. CPSF5/CPSF6 can disassemble the hyperstable CA_CC rod in vitro. CPSF5/CPSF6 cannot form complex with crosslinked CA hexamer, but forms complex with CA_CC rod and viral core. We have obtained preliminary low-resolution structures of the CPSF5/CPSF6 complexed with CA_CC rod or HIV-1 core.Our findings indicate that overexpression of either isoform 1 or isoform 2 of CPSF5/CPSF6 in HEK293T cells results in a reduction in HIV-1 infectivity. Further investigation is required to elucidate the impact of CPSF5/CPSF6 on HIV-1 nuclear import and uncoating. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 16230658 Université de Strasbourg Strasbourg 2024-12-31 application/pdf 16274240 http://www.theses.fr/2024STRAE022/document http://www.theses.fr/2024STRAJ022/abes Zhu Rui 1992-10-10 FR 280123515 0EFB1U05GN5 21921820 4200047 https://theses.fr/2024STRAJ022 2024STRAJ022 https://doi.org/10.70675/899489dfz5ad8z4046zaaabzdef2de687102 2024-06-28 Biophysique et biologie structurale Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Ruff Marc MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 167631543 Moog Christiane MADS_PRESIDENT_DU_JURY 074287788 Di Nunzio Francesca MADS_RAPPORTEUR_1 235313424 Roussel Alain MADS_RAPPORTEUR_2 112788351 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 414 156502844 Institut de génétique et de biologie moléculaire et cellulaire (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 155263749 93800 ddc:570 Ruff Marc Moog Christiane Di-Nunzio Francesca Roussel Alain École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Institut de génétique et de biologie moléculaire et cellulaire (Strasbourg) PDF 16230658 confidentialité 2024-06-28 2026-06-30 confidentialité 2024-06-28 2026-06-30 restriction 2024-06-28 2026-06-30 confidentialité 2024-06-28 2026-06-30 confidentialité 2024-06-28 2026-06-30