Note ABES Régulation de l’homéostasie du zinc et du manganèse chez Staphylococcus aureus : implication des ARN régulateurs ZinS et RsaC Zinc and manganese homeostasis regulation in Staphylococcus aureus : involvement of the regulatory RNAs ZinS and RsaC Staphylococcus aureus ARN régulateurs Métaux Immunité nutritionnelle Staphylococcus aureus Regulatory RNA Metals Nutritional immunity 612.022 579.353 Homéostasie Staphylocoque doré ARN régulateur Lors d’une infection à Staphylococcus aureus, pathogène majeur de l’Homme, les cellules immunitaires séquestrent des métaux qui sont essentiels à la croissance du pathogène (Mn2+, Zn2+), à travers la dégranulation de la calprotectine. Lors de ma thèse, j’ai caractérisé un ARN régulateur (sARN) nommé ZinS, exprimé lors d’une carence en Zn2+ et réprimé par le facteur de transcription (FT) Zur en présence de Zn2+. Grâce à la technique du MAPS (MS2-affinity purification coupled with RNA sequencing), de la protéomique différentielle, et de diverses approches in vitro, j’ai montré que ZinS cible et régule divers ARNm impliqués dans l’utilisation du Zn2+, dans diverses voies métaboliques et dans la virulence. En particulier, certains ARNm codent pour des enzymes qui nécessitent le Zn2+ comme co-facteur, suggérant que le sARN redirige le Zn2+ intracellulaire vers des enzymes essentielles. Une autre cible code pour GpmA, une enzyme de la glycolyse qui devient essentielle en présence de calprotectine. Mes résultats montrent aussi que la régulation de l’ARNm gpmA implique une double régulation par RsaC et MntR. RsaC est un sARN exprimé lors d’une carence en Mn2+, qui est réprimé par MntR en présence de Mn2+. Ainsi, ZinS et RsaC interconnectent l’homéostasie du Zn2+ et du Mn2+, aidant S. aureus à adapter son métabolisme pour survivre en conditions de carence en métaux (immunité nutritionnelle). D’autres interconnections ont été observées par l’étude des régulons de MntR et de Zur. Ainsi, le duo de régulateurs sARN/FT est une des stratégies utilisées par S. aureus pour s’adapter au stress métallique. Staphylococcus aureus is a major human pathogen that triggers a variety of immune responses, including the sequestration of essential metals (Mn2+, Zn2+), through the degranulation of calprotectin. During my PhD, I characterized a Zn2+-responsive regulatory RNA (sRNA), named ZinS. In fact, I showed that ZinS is expressed during Zn2+ deficiency and is repressed by the transcriptional factor (TF) Zur in the presence of Zn2+. Using the MAPS technique (MS2-affinity purification coupled with RNA sequencing), differential proteomics, and several in vitro techniques, I found that ZinS targets and regulates various mRNAs encoding proteins which use Zn2+ as co-factor, or which are involved in various metabolic pathways and in virulence. In particular, some mRNAs encode enzymes that require Zn2+ as a co-factor, suggesting that ZinS redirects intracellular Zn2+ to essential enzymes. Another mRNA target encodes GpmA, a glycolytic enzyme essential during calprotectin exposure. The results showed that gpmA regulation also includes RsaC and MntR. RsaC is an sRNA expressed during Mn2+ deficiency and repressed by MntR in the presence of Mn2+. Thus, ZinS and RsaC interconnect Zn2+ and Mn2+ homeostasis, helping S. aureus to survive under metal deficiency conditions (also called, nutritional immunity). Other interconnections were observed through the study of MntR and Zur regulons. Hence, the sRNA/FT regulators are one of the strategies used by S. aureus to adapt to metal stress. Electronic Thesis or Dissertation Text fr PDF 4903745 Université de Strasbourg Strasbourg 2024-12-31 text/html http://www.theses.fr/2024STRAJ024/document Charbonnier Mathilde 1997-04-19 FR 273308351 1508024402J 21500133 4200047 https://theses.fr/2024STRAJ024 2024STRAJ024 https://doi.org/10.70675/4a647993ze859z412czb50cz8bedcb476497 2024-09-05 Aspects moléculaire et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Lalaouna David MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 169257355 Geoffroy Valérie MADS_PRESIDENT_DU_JURY 138968799 Guillier Maude MADS_RAPPORTEUR_1 08943353X Darfeuille Fabien MADS_RAPPORTEUR_2 071086323 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 414 156502844 Architecture et réactivité de l'ARN (Strasbourg ; 1992-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 157545687 ddc:610 ddc:570 Lalaouna David Geoffroy Valérie Guillier Maude Darfeuille Fabien École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Architecture et réactivité de l'ARN (Strasbourg ; 1992-....) PDF 4903745 confidentialité 2024-09-05 2027-09-30 confidentialité 2024-09-05 2027-09-30 confidentialité 2024-09-05 2027-09-30