Note ABES Conception et caractérisation de complexes protéiques à topologie non classique pour l'étude de protéines intrinsèquement désordonnées Design and characterization of protein complexes with non-canonical topology to study intrinsically disordered proteins Protéines intrinsèquement désordonnées Topologie non-classique Peptide cyclique Synthèse chimio-enzymatique Études biophysiques Production recombinante Pénétration cellulaire Intrinsically disordered proteins Non-canonical topology Cyclic peptide Chemoenzymatic synthesis Biophysical studies Recombinant production Intracellular delivery 572 Protéines intrinsèquement désordonnées Peptides cycliques Synthèse (chimie) Biophysique Cette thèse s’est concentrée sur la conception moléculaire de complexes protéiques non-classiques afin d’étudier l’interaction entre les coactivateurs transcriptionnels liés au cancer, ACTR et CBP/p300, qui contiennent des régions intrinsèquement désordonnées. Des variants conformationnellement contraints du domaine d’activation d’ACTR ont été développés par cyclisation tête-à-queue et/ou incorporation d’acides aminés α-méthylés. Une stratégie chimio-enzymatique combinant la synthèse peptidique sur phase solide et la cyclisation enzymatique a permis la production d’analogues cycliques d’ACTR. Les propriétés biophysiques de ces variants ont été déterminées afin d’évaluer l’impact des contraintes conformationnelles. De plus, l’ACTR cyclique ainsi que son domaine de liaison issu de CBP ont été produits de manière recombinante et marqués avec des isotopes 13C et 15N pour des analyses par RMN, dans le but d’obtenir des informations structurales. Enfin, des essais cellulaires préliminaires ont été réalisés pour évaluer l’efficacité de pénétration de ces variantes dans des cellules cancéreuses de la prostate. This thesis focused on the molecular design of non-canonical protein complexes to study the interaction between the cancer-related transcriptional coactivators ACTR and CBP/p300 containing intrinsically disordered regions. Conformationally constrained variants of the activation domain of ACTR were developed through head-to-tail cyclization and/or incorporation of α-methylated amino acids. A chemoenzymatic strategy combining solid-phase peptide synthesis with enzymatic cyclization enabled the production of cyclic ACTR analogues. The biophysical properties of these variants were determined to assess the impact of conformational constraints. Furthermore, the cyclic ACTR as well as its binding domain from CBP were recombinantly produced and labelled with 13C,15N-isotopes for NMR analysis to gain structural insights. Finally, preliminary cellular assays were conducted to evaluate the penetration efficiency of these variants into prostate cancer cells. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 26814865 https://publication-theses.unistra.fr/restreint/theses_doctorat/2025/Soehnlen_Elodie_2025_ED222.pdf Soehnlen Élodie 1999-02-26 FR 292607350 1510006674C 21703661 4200003 https://theses.fr/2025STRAF042 2025STRAF042 https://doi.org/10.70675/381ba033zbf91z415dzb9cbza5a54e1c17be 2025-10-10 Chimie biologique Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Torbeev Vladimir MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 6400 231409664 Bihel Frédéric MADS_PRESIDENT_DU_JURY 177118180 Faure Sophie MADS_RAPPORTEUR_1 077751019 Lequin Olivier MADS_RAPPORTEUR_2 127152601 École doctorale des Sciences chimiques (Strasbourg ; 1995-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 222 156504081 Biotechnologie et signalisation cellulaire (Strasbourg ; 2011-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 207563 157715205 ddc:540 Torbeev Vladimir Bihel Frédéric Faure Sophie Lequin Olivier École doctorale des Sciences chimiques (Strasbourg ; 1995-....) Biotechnologie et signalisation cellulaire (Strasbourg ; 2011-....) PDF 26814865 confidentialité 2025-10-10 2030-12-31 confidentialité 2025-10-10 2030-12-31 confidentialité 2025-10-10 2030-12-31