Note ABES Genetic tools to study arbovirus infection and modify populations of Aedes aegypti mosquitoes Outils génétiques pour étudier l’infection par des arbovirus et modifier les populations de moustiques Aedes aegypti Aedes aegypti Transgenèse Forçage génétique Toxine-Antidote Lipophorine Haploinsuffisant Dicer 2 CRISPR-Cas9 Remplacement de population Salivation Zika Chikungunya Arbovirus Transmission Aedes aegypti Transgenesis Gene Drive Toxin-Antidote Lipophorin Haploinsufficient Dicer 2 CRISPR-Cas9 Population replacement Salivation Zika Chikungunya Arbovirus Transmission 572.8 579.2 Arboviroses Transmission Aedes aegypti Vecteurs de maladies Relations hôte-virus Génie génétique L’objectif de ce doctorat était de développer des outils génétiques pour l’étude et la réduction de l’infection par les arbovirus chez le moustique Aedes aegypti. Nous avons conçu une stratégie de Forçage Génétique (FG) afin de renforcer l’immunité antivirale, fondée sur un système Toxine-Antidote (TA). La Toxine CRISPR-Cas9 cible le gène essentiel et haploinsuffisant lipophorine (lp), et l’antidote est une version recodée et résistante de lp. Chez les descendants de croisements entre FG et sauvages (WT), la mutation de l’allèle WT est létale, empêchant le croisement et conduisant à la suppression de la population WT au-delà d’un seuil de libération de moustiques FG. Un système TA fonctionnel a été établi chez A. aegypti et sera optimisé. En parallèle, une lignée transgénique a été développée pour l’étude de la salivation, révélant une absence de corrélation entre salivation et transmission virale, et une réduction de la salivation lors d’infections par les virus Zika ou chikungunya. This PhD aimed to develop genetic tools to investigate and mitigate arbovirus infection in the mosquito Aedes aegypti. First, a Gene Drive strategy was designed to enhance mosquito antiviral immunity through a CRISPR-Cas9 Toxin-Antidote (TA) system. The Toxin targets the essential, haploinsufficient lipophorin (lp) gene, while the Antidote encodes a recoded, resistant version of lp. In the progeny of Gene Drive (GD) and wild-type (WT) crosses, mutation of the WT lp allele is lethal, preventing interbreeding and enabling WT population suppression above a certain release threshold of GD mosquitoes. An efficient TA system was established in A. aegypti and is to be further optimized. In parallel, a transgenic reporter line was developed to study salivation. Results showed that salivation does not correlate with viral transmission and is significantly reduced upon Zika or chikungunya infection, challenging the current model linking transmission to infected saliva release. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 86913937 http://www.theses.fr/2025STRAJ050/document http://www.theses.fr/2025STRAJ050/abes Souriac Lucie 1998-07-03 FR 291487475 1609016739N 22117503 4200047 https://theses.fr/2025STRAJ050 2025STRAJ050 https://doi.org/10.70675/458660cazacd2z4b92z9d56z77562c93d1bf 2025-09-05 Génétique Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Marques João Trindade MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 23075029X Marois Eric MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_2 174902190 Meignin Carine MADS_PRESIDENT_DU_JURY 238184706 Bonizzoni Mariangela MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 080737730 Nolan Tony MADS_MEMBRE_DU_JURY_2 291488102 Alphey Luke MADS_RAPPORTEUR_1 086277510 Gabrieli Paolo MADS_RAPPORTEUR_2 291487963 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 414 156502844 Modèles Insectes de l'Immunité Innée (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 157771342 561325 ddc:570 Marques João Trindade Marois Eric Meignin Carine Bonizzoni Mariangela Nolan Tony Alphey Luke Gabrieli Paolo École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Modèles Insectes de l'Immunité Innée (Strasbourg) PDF 86913937 confidentialité 2025-09-05 2027-01-01 confidentialité 2025-09-05 2027-01-01 confidentialité 2025-09-05 2027-01-01 confidentialité 2025-09-05 2027-01-01