Note ABES Régulateurs de sites de contact membranaires entre les endosomes et le réticulum endoplasmique et du positionnement des endosomes tardifs STARD3 and GSK3 : regulators of membrane contact sites between the endoplasmic reticulum and endosomes, and of late endosomes positioning Sites de contact membranaire Réticulum endoplasmique Endosomes tardifs/lysosomes GSK3 STARD3 Motif Phospho-FFAT Membrane contact site Endoplasmic reticulum Late endosomes/lysosomes GSK3 STARD3 Phospho-FFAT motif 616.99 572.6 Cancer du sein Protéines membranaires Régulation cellulaire Réticulum endoplasmique La protéine STARD3 est sur-exprimée dans les cancers du sein HER2+ et participe à leur croissance. Cette protéine modulaire comporte un domaine MENTAL d’ancrage aux endosomes tardifs/lysosomes (ET/Lys), un motif Phospho-FFAT et un domaine START de transport de cholestérol. La phosphorylation du motif Phospho-FFAT de STARD3 active son interaction avec le domaine MSP des protéines VAP (VAPA, VAPB et MOSPD2) localisées au Réticulum Endoplasmique (RE), permettant la formation de Sites de Contacts Membranaires (SCM) RE- ET/Lys. La kinase GSK3 est responsable de cette phosphorylation et régule l’interaction de STARD3 avec les protéines VAP et les SCM entre le RE et les ET/Lys. En absence de phosphorylation, les ET/Lys s’agrègent en région périnucléaire. Ce phénotype dépend aussi du domaine START, dont nous avons identifié une nouvelle fonction : il est capable d’interagir avec les membranes chargées négativement, et est responsable du regroupement des ET/Lys positifs pour STARD3 lorsque cette dernière n’est pas engagée dans un contact RE-ET/Lys. Ainsi, la phosphorylation de STARD3 par GSK3 contrôle la formation de SCM et le positionnement des ET/Lys. STARD3 is overexpressed in HER2+ breast cancers and contributes to their growth. This modular protein contains a MENTAL domain anchoring it to late endosomes/lysosomes (LE/Lys), a Phospho-FFAT motif, and a START domain involved in cholesterol transport. Phosphorylation of the Phospho-FFAT motif activates its interaction with the MSP domain of VAP proteins (VAPA, VAPB, and MOSPD2) located at the endoplasmic reticulum (ER), allowing the formation of membrane contact sites (MCSs) between ER and LE/Lys. The kinase GSK3 is responsible for this phosphorylation and regulates STARD3’s interaction with VAP proteins and ER–LE/Lys MCSs. In the absence of phosphorylation, LE/Lys aggregate in the perinuclear region. This phenotype also depends on the START domain, for which we identified a new function: it can interact with negatively charged membranes and drives the clustering of STARD3-positive LE/Lys when not engaged in ER-LE/Lys contact. Thus, STARD3 phosphorylation by GSK3 controls both MCS formation and LE/Lys positioning. Electronic Thesis or Dissertation Text fr PDF 92058356 https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2025/EICHLER_Julie_2025_ED414.pdf http://www.theses.fr/2025STRAJ073/abes https://theses.hal.science/tel-05425729 https://theses.hal.science/tel-05425729 https://theses.hal.science/tel-05425729 Eichler Julie 1996-10-22 FR 292683804 1507006189F 21403125 4200047 https://theses.fr/2025STRAJ073 2025STRAJ073 https://doi.org/10.70675/3f76c457z4a4bz4733z9c68z7243e0b23dc2 2025-09-12 Aspects moléculaire et cellulaires de la biologie Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Alpy Fabien MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 070342768 Hyenne Vincent MADS_PRESIDENT_DU_JURY 097917842 Heuzé Mélina MADS_RAPPORTEUR_1 120416093 Lutz Christel MADS_RAPPORTEUR_2 138015015 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 414 156502844 Institut de génétique et de biologie moléculaire et cellulaire (Strasbourg) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 155263749 93800 ddc:610 ddc:570 Alpy Fabien Hyenne Vincent Heuzé Mélina Lutz Christel École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Institut de génétique et de biologie moléculaire et cellulaire (Strasbourg) PDF 92058356