Note ABES Analysis of the molecular mechanisms regulation the interactions between the retroviral Gag precursors and genomic RNA : a retroviral assembly reconstitution Analyse des mécanismes moléculaire régulant les interactions entre les précurseurs rétroviraux Gag et l’ARN génomique : une reconstitution de l’assemblage rétroviral FIV MMTV Assemblage rétroviral Gag ARNg Interaction protéines-ARN Membrane lipidique Microscopie confocale RICS FIV MMTV Retroviral assembly Gag GRNA Protein-RNA interactions Lipid membrane Confocal microscopy RICS 579.25 572.6 Protéines virales Interactions ARN-protéine Rétroviridés Les précurseurs rétroviraux Gag (PrGag) selectionnent spécifiquement un dimère d’ARN génomique (ARNg) parmis les ARN viraux épissés et cellulaires pour assurer la réplication virale. Les PrGag multimérisent ensuite autour de l’ARNg à la membrane plasmique (MP) chez le virus de l’immunodéficience féline (FIV) ou dans le cytosol chez le virus de la tumeur mammaire murine (MMTV), cette étape étant régulée via des interactions protéine-ARN. Durant ma thèse, j’ai étudié les déterminants moléculaires des interactions PrGag/ARNg dans ces deux modèles par microscopie confocale in vitro et in cellula. En reconstituant l’assemblage à la MP, j’ai mis en évidence, chez le FIV, le rôle critique des résidus Y310/L311 du Pr50Gag dans son oligomérisation, et observé que l’état multimérique de Pr50Gag ainsi que son orientation imposée par la myristoylation influencent l’interaction avec l’ARN. Chez le MMTV, j’ai pu observer la formation de multimères cytoplasmiques qui pourraient correspondre aux complexes d’assemblage. Nos analyses montrent que la myristoylation de Pr77Gag joue aussi un rôle dans son oligomérisation. Ces résultats ouvrent la voie à une compréhension plus fine des mécanismes gouvernant l’encapsidation de l’ARNg et l’assemblage de ces rétrovirus. Retroviral Gag precursors (PrGag) specifically select a dimer of genomic RNA (gRNA) among a pool of spliced viral and cellular RNAs to ensure viral replication. PrGag molecules then multimerize around the gRNA at the plasma membrane (PM) in feline immunodeficiency virus (FIV) or within the cytosol in mouse mammary tumor virus (MMTV), a process regulated through protein–RNA interactions. During my PhD, I investigated the molecular determinants of PrGag/gRNA interactions in these two models using confocal microscopy both in vitro and in cellula. By reconstituting assembly at the PM, I identified in FIV a critical role of residues Y310/L311 in Pr50Gag oligomerization, and observed that its multimeric state and myristoylation-dependent orientation influence RNA binding. In MMTV, Pr77Gag formed cytoplasmic multimers that may correspond to assembly complexes. Our analyses further showed that Pr77Gag myristoylation contributes to its oligomerization. Altogether, these findings provide new insights into the molecular mechanisms governing gRNA encapsidation and retroviral assembly. Electronic Thesis or Dissertation Text en PDF 4619974 http://www.theses.fr/2025STRAJ129/document https://theses.fr/2025STRAJ129/abes Santier Florine 1999-10-11 FR 283726504 1410001139J 22002278 4200047 https://theses.fr/2025STRAJ129 2025STRAJ129 https://doi.org/10.70675/aad5b053z815cz4813zad55zc15f01d0aa70 2025-11-28 Virologie : aspects moléculaires et médicaux Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Bernacchi Serena MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_1 074721747 Chiantia Salvatore MADS_DIRECTEUR_DE_THESE_2 296273716 Dimitrova Maria MADS_PRESIDENT_DU_JURY 204203112 Anton Halina MADS_MEMBRE_DU_JURY_1 225407493 Sauer Michael MADS_MEMBRE_DU_JURY_2 296465968 Herrmann Andreas MADS_RAPPORTEUR_1 296273813 Guillon Christophe MADS_RAPPORTEUR_2 177999357 École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) MADS_ECOLE_DOCTORALE_1 414 156502844 Architecture et réactivité de l'ARN (Strasbourg ; 1992-....) MADS_PARTENAIRE_DE_RECHERCHE_1 157545687 93780 ddc:570 Bernacchi Serena Chiantia Salvatore Dimitrova Maria Anton Halina Sauer Michael Herrmann Andreas Guillon Christophe École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) Architecture et réactivité de l'ARN (Strasbourg ; 1992-....) PDF 4619974 confidentialité 2025-11-28 2026-12-31 confidentialité 2025-11-28 2026-12-31 confidentialité 2025-11-28 2026-12-31 confidentialité 2025-11-28 2026-12-31