Rôle du pH intracellulaire dans le contrôle de la différenciation des cellules oligodendrocytaires
Langue Français
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Auteur : Bernard, Frédéric
Date de soutenance : 01-01-2003
Directeur(s) de thèse : Aunis, Dominique
Établissement de soutenance : Université Louis Pasteur (Strasbourg)
École doctorale : École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....)
Discipline : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie
Classification : Sciences de la vie, biologie, biochimie
Mots-clés libres : Cellules
Mots-clés :
- Cellules
- Thèses et écrits académiques
- Cellules
- Thèses et écrits académiques
- pH
- Thèses et écrits académiques
- Névroglie
- Thèses et écrits académiques
Résumé : Une augmentation spontanée du pH intracellulaire (pHi) des précurseurs oligodendrocytaires (OLP) est enregistrée au début de leur différenciation. Sur divers types cellulaires, des changements similaires de pHi constituent souvent une réponse à l'application de divers facteurs (facteurs de croissance, hormones). Nous avons analysé le rôle du pHi dans le déclenchement de la différenciation et dans les processus d'élaboration des prolongements des OLP. Les effets sur le pHi d'un agent pro-différenciant (l'acide rétinoïque, AR) et d'une molécule de guidage contrôlant la morphologie des oligodendrocytes (la sémaphorine 3A, Sema3A), ont été analysés par microfluorimétrie du BCECF. Les effets de manipulations expérimentales du pHi sur la morphologie des OLP ont été quantifiés par une méthode originale d'analyse basée sur l'utilisation de la géométrie fractale. L'application d'AR stimule la différenciation des OLP, un doublement du nombre de cellules exprimant le galactocérébroside est observé après 72 heures de traitement. Parallèlement, l'addition d'AR entraîne une augmentation du pHi de 0,25 unité. Cette alcalinisation est directement liée à l'augmentation d'activité de l'échangeur Na+/H+. La suppression expérimentale de cette alcalinisation empêche la stimulation de la différenciation par l'AR. Inversement, la reproduction expérimentale de cette alcalinisation, en l'absence d'AR, stimule la différenciation dans les mêmes proportions que l'AR. Nous avons également montré que cette alcalinisation induisait une activation des MAPK ERK1/2. L'utilisation d'autres valeurs expérimentales de pHi a permis de montrer que le taux de différenciation des OLP est principalement dépendant de pHi. Nous avons montré que les OLP expriment de manière fonctionnelle la plexine-A1, une sous unité du récepteur de la Sema3A. L'addition de Sema3A induit une diminution importante de la complexité morphologique des OLP. Parallèlement, Sema3A induit une acidification intracellulaire transitoire de 0,13 unité pH, concomitante d'une diminution d'activité des MAPK ERK1/2. La suppression expérimentale de l'acidification observée inhibe totalement l'effet de Sema3A sur la morphologie des OLP. Ces résultats démontrent que le pH intracellulaire constitue l'un des signaux impliqués dans les processus de différenciation et de croissance cellulaires.
Entrepôt d'origine : 
Identifiant : ecrin-ori-285621
Type de ressource : Thèse
