Application des multicouches de polyélectrolytes au transfert de gène Polyelectrolyte multilayer,application for surface mediated gene delivery transfection polyélectrolytes multicouches PEI/ADNp biofonctionnalisation Pas de mots clés en anglais 572.5 Transfert génétique Thèses et écrits académiques Polyélectrolytes Thèses et écrits académiques Plasmides Thèses et écrits académiques Cellules hépatiques Thèses et écrits académiques Thérapie génique Thèses et écrits académiques Biomatériaux Thèses et écrits académiques L'auto assemblage moléculaire est une approche puissante permettant la formation, par des interactions faibles et non covalentes, de nouvelles architectures supramoléculaires telles que des matrices polymériques d'ordre nanométrique ou micrométrique que représentent les multicouches de polyélectrolytes. Les multicouches de polyélectrolytes sont des films pouvant être générés sur tout type de surface quelle que soit leur taille et leur forme offrant un champ d'application vaste, leur fonctionnalisation se faisant, à façon, par des protéines ou des peptides d'intérêts. L'incorporation d'ADN plasmidique tant à remplacer l'utilisation de protéines pour permettre un effet rémanent par création de bio réacteurs in situ représentés les cellules transfectées. Nous avons étudié l'incorporation d'ADN sous forme de complexes avec le PEI linéaire de 22 kDa (polyplexes) dans des multicouches de polyélectrolytes afin de constituer un système de transfection locale en phase solide. L'enfouissement possible de polyplexes dans des architectures composées de polyélectrolytes naturels (CHI, HA) et synthétiques (PLL,PGA,PAH,PSS) permet la création d'architectures composites au comportement variable offrant une accessibilité différée des polyplexes aux cellules cultivées à leur contact. Ces architectures ont montré une capacité de transfection sur divers types cellulaires et quel que soit le type de polyélectrolyte. Néanmoins la nature des polyélectrolytes et des polyplexes influencent la capacité de transfection des architectures. Elle peut être augmentée par adsorption séquentielle de plusieurs couches de polyplexes mais également par incorporation de peptides. L'incorporation dans l'architecture de NDP-MSH à distance des polyplexes a permis de multiplier par trois la capacité de transfection sur des cellules hépatiques de type Huh-7. Ces architectures de polyélectrolytes incorporant différents signaux ouvrent de nouvelles perspectives pour l'ingénierie tissulaire et la vaccination. Molecular self-assembly is a powerful approach for fabricating novel supramolecular architectures, by weak and non covalent interaction, as polymeric matrices of nanometric scale like polyelectrolyte multilayers. According to their easy build up on every surface whatever their shape or their size, polyelectrolyte multilayers give large field of application by functionalisation by protein or peptide embedding. Because of the lack stability on time of proteins, gene activated matrices use cell as bioreactor by transfection for prolonged effect. Then we study incorporation of DNA as complexes with linear PEI (22kDa) (polyplexes) into polyelectrolyte multilayers to generate a local transfection vector in a solid state. We demonstrate that polyplexes embedding is possible in architecture constitute of natural (CHI,HA) and synthetics (PLL,PGA,PSS,PAH) polyélectrolytes. Various degradability process of polyelectrolyte multilayer, according to the nature of their constituent, offer specific time accessibility of polyplexes by cell cultivated on these surfaces. All architectures tested exhibit transfection ability on various cell line increasing with incubation time whatever polyelectrolyte nature. But the nature of polyelectrolytes and polyplexes influence transfection in term of efficiency and stability. Efficiency can be boosted by sequential adsorption of polyplexes or by peptide incorporation into the architecture. Transfection efficiency on hepatocyte cell type Huh-7, for example, is raised by incorporation of NDP-MSH. Versatile polyelectrolyte structure exhibiting several signals open new prospects for their use in complex biological process like vaccination or tissue engineering. Electronic Thesis or Dissertation Text fr France PDF https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2006/MEYER_Florent_2006.pdf Université de Strasbourg Strasbourg Meyer Florent 1977-01-01T00:00:00 FR 149191030 http://www.theses.fr/2006STR13045 2006STR13045 2006-03-17T00:00:00 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Université Louis Pasteur (Strasbourg) 026404540 Doctorat Docteur es non oui Ogier Joelle 078869471 École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) ED414 156502844 ddc:570