Analyse fonctionnelle de deux cytochromes P450 de la famille CYP98 chez Nicotiana tabacum cytochrome P450 CYP98 Nicotiana tabacum Pas de mots clés en anglais 581.3 Cytochrome P450 Thèses et écrits académiques Biosynthèse Thèses et écrits académiques Nicotiana tabaccum Thèses et écrits académiques Chlorogénique, Acide Thèses et écrits académiques Lignine Thèses et écrits académiques Les cytochromes P450 végétaux de la famille CYP98 sont impliqués dans la voie de synthèse des phénylpropanoïdes. J'ai cloné deux séquences codant pour des CYP98s de tabac : CYP98A30 et CYP98A31. L'activité de CYP98A30 a été testée in vitro dans différents systèmes mais aucune métabolisation n a été détectée. Les résultats obtenus in vivo indiquent que CYP98A30 est exprimée et active dans la plante (activité 3 -hydroxylase). Cette protéine serait impliquée dans les mécanismes de défense et elle participerait à la synthèse de l'acide chlorogénique. L'activité de CYP98A31 a été caractérisée in vitro : cette protéine métabolise le coumaroyl quinate et le coumaroyl shikimate, avec une nette préférence pour ce dernier substrat. Une approche in vivo m a ensuite permis d'investiguer le rôle physiologique de CYP98A31 : cette enzyme est impliquée dans la voie de synthèse de la lignine et dans celle de l'acide chlorogénique, composé phénolique qui agit comme antioxydant dans les plantes.Plant cytochromes P450 of the CYP98 family are implied in the phenylpropanoid pathway. I cloned sequences coding for two CYP98s in tobacco: CYP98A30 and CYP98A31. The activity of CYP98A30 was tested in vitro in several heterologous systems but no metabolisation was detected. In vivo results indicate that CYP98A30 is expressed and active as a 3 -hydroxylase in tobacco. This protein might be involved in defense mechanisms. Moreover overexpression experiments showed that CYP98A30 takes part in the synthesis of chlorogenic acid. The activity of CYP98A31 was measured in vitro : this protein 3 -hydroxylates coumaroyl-quinate and preferentially coumaroyl-shikimate. In vivo this enzyme is implied in the biosynthesis of lignin and chlorogenic acid, a phenol which acts as an antioxydant in plants. My work enabled us to advance in the elucidation of the chlorogenic acid pathway in plants. Plant cytochromes P450 of the CYP98 family are implied in the phenylpropanoid pathway. I cloned sequences coding for two CYP98s in tobacco: CYP98A30 and CYP98A31. The activity of CYP98A30 was tested in vitro in several heterologous systems but no metabolisation was detected. In vivo results indicate that CYP98A30 is expressed and active as a 3 -hydroxylase in tobacco. This protein might be involved in defense mechanisms. Moreover overexpression experiments showed that CYP98A30 takes part in the synthesis of chlorogenic acid. The activity of CYP98A31 was measured in vitro : this protein 3 -hydroxylates coumaroyl-quinate and preferentially coumaroyl-shikimate. In vivo this enzyme is implied in the biosynthesis of lignin and chlorogenic acid, a phenol which acts as an antioxydant in plants. My work enabled us to advance in the elucidation of the chlorogenic acid pathway in plants. Electronic Thesis or Dissertation Text fr France PDF https://publication-theses.unistra.fr/restreint/theses_doctorat/2006/MILLION-ROUSSEAU_Rachel_2006.pdf Université de Strasbourg Strasbourg Million-Rousseau Rachel 1979-01-01T00:00:00 FR 144366088 http://www.theses.fr/2006STR13142 2006STR13142 2006-10-13T00:00:00 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Université Louis Pasteur (Strasbourg) 026404540 Doctorat Docteur es non oui Reichhart Danièle 060823755 École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) ED414 156502844 ddc:580