Nouvelles données biologiques et structurales des chromogranines A et B : implication dans le mécanisme d'ubiquitination et dégradation protéolytique par l'endoprotéase Glu-C de Staphylococcus aureus
Langue Français
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Auteur : Shooshtarizadeh, Peiman
Date de soutenance : 03-10-2008
Directeur(s) de thèse : Metz, Marie-Hélène
Établissement de soutenance : Université Louis Pasteur (Strasbourg)
École doctorale : École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....)
Discipline : Sciences de la vie et de la santé - Sciences de la Terre et de l'Univers
Classification : Sciences de la vie, biologie, biochimie
Mots-clés libres : médullo-surrénale , chromogranines , ubiquitine , staphylococcus aureus , peptides antimicrobiens , immunité innnée
Mots-clés :
- Staphylocoque doré
- Thèses et écrits académiques
- Ubiquitines
- Thèses et écrits académiques
Résumé : L'analyse du matériel protéique contenu dans les granules de sécrétion des cellules chromaffines et sécrété avec les catécholamines dans les états de stress a été effectué. Notre intérêt s'est plus particulièrement porté sur les chromogranines et l'ubiquitine. Les chromogranines sont les protéines majoritaires de la matrice des granules de sécrétion des cellules chromaffines de la médullo surrénale. Leur séquence possède plusieurs sites multibasiques qui sont des cibles de clivage potentiel par les enzymes protéolytiques et elles possèdent de nombreuses modifications post traductionnelles (glycosylation, phosphorylation et sulfatation) qui peuvent moduler la dégradation protéolytique et les activités biologiques des peptides qui en sont issus. Plusieurs peptides dérivés des chromogranines A et B (CGA, CGB) aussi que de l'ubiquitine (Ub) possèdent une activité antimicrobienne contre différents microorganismes (bactéries, champignons, levures et parasites). Dans une première partie, nous avons recherché la présence de chromogranines ubiquitynilées. Mes recherches ont permis de démontrer la présence du premier enzyme de la voie d'ubiquitination, l'ubiquitin activating enzyme (E1) au niveau de la matrice et de la membrane des granules chromaffines. L'association de l'ubiquitine avec la CGA a été démontrée par analyse protéomique et la technique Bio Plex. Nous avons ensuite montré que la partie C ter de la CGA possède un site de reconnaissance à l'ubiquitine (Ubiquitine Interacting Motif, UIM) très conservé au cours de l'évolution. Ce nouveau résultat suggère que la CGA participe à la machinerie d'ubiquitination présente sur la membrane des granules chromaffines. Dans une seconde partie, la protéolyse par la protéase V8 de Staphylococcus aureus du contenu protéique des granules chromaffines a été analysée. De nouveaux peptides principalement issus de la CGA et de la CGB dont l'activité antimicrobienne a été caractérisée ont été identifiés. Les peptides générés présentent principalement des activités antifongiques, mais aucun peptide n a été trouvé actif contre S. aureus. Ces observations permettent de proposer un mécanisme nouveau et inattendu de subversion du système immunitaire inné de l'hôte par un facteur de virulence du pathogène de génération de nouveaux agents antimicrobiens.
Entrepôt d'origine : 
Identifiant : ecrin-ori-297609
Type de ressource : Thèse
