Manipulations microfluidiques de gouttelettes pour l'évolution dirigée des protéines
Langue Anglais
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Auteur : Mazutis, Linas
Date de soutenance : 10-12-2009
Directeur(s) de thèse : Griffiths, Andrew
Établissement de soutenance : Université de Strasbourg
École doctorale : École doctorale Sciences chimiques (Strasbourg ; 1995-....)
Discipline : Sciences chimiques
Classification : Sciences de la vie, biologie, biochimie, Génie chimique, technologies alimentaires
Mots-clés libres : Microfluidique
Mots-clés :
- Microfluidique
- Thèses et écrits académiques
- Circuits intégrés
- Thèses et écrits académiques
- Gouttes
- Thèses et écrits académiques
- Protéines
- Thèses et écrits académiques
Résumé : La compartimentalisation de la "soupe primordiale" dans des vésicules est considérée comme l'un des principaux facteurs ayant permis l'émergence de la vie. Ces gouttelettes de quelques micromètres créent un lien entre génotype et phénotype, et grâce à la division, un mécanisme pour l'hérédité et l'évolution, qui a conduit à l'émergence des cellules actuelles. De tels microcompartiments, peuvent être créés au laboratoire sous la forme d'une émulsion composée de millions de gouttelettes contenant des gènes et tous les ingrédients nécessaires pour leur expression in vitro. Ces émulsions miment ainsi des populations de cellules artificielles qui peuvent être sélectionnées pour un phénotype donné sous des conditions strictement contrôlées non réalisables dans des systèmes in vivo. Cette thèse de doctorat présente le développement de systèmes microfluidiques pour l'évolution dirigée. Les résultats obtenus montrent qu il est possible de produire des gouttelettes hautement monodisperses pouvant être manipulées de manière précise et contrôlable, ce qui était jusqu à présent impossible pour des émulsions réalisées par des méthodes classiques. En utilisant un ensemble de nouveaux dispositifs microfluidiques et une composition adéquate d'huile porteuse, des gènes uniques ont été amplifiés et leur expression in vitro mesurée en microgouttelettes. Ces dispositifs ont ensuite été utilisés pour réaliser et analyser des réactions biologiques complexes et multi-étapes. Une technique originale de fusion passive de paires de gouttelettes a également été développée. Ces travaux constituent les premiers pas vers la création de plate-formes microfluidiques intégrées et totalement in vitro.
Entrepôt d'origine : 
Identifiant : ecrin-ori-299039
Type de ressource : Thèse
