Réplication de l'ADN endommagé chez les eucaryotes : régulation et rôle de la mono-ubiquitination de PCNA
Langue Français
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Auteur : Schmutz, Valérie
Date de soutenance : 01-07-2010

Directeur(s) de thèse : Cordonnier, Agnès


Établissement de soutenance : Université de Strasbourg
École doctorale : École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....)
 
Discipline : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie
Classification : Sciences de la vie, biologie, biochimie

Mots-clés libres : PCNA , mono-ubiquitination , synthèse translésionnelle , extrait cellulaire humain , pol eta , rad6/Rad18
Mots-clés :
  • ADN - Thèses et écrits académiques
  • Cellules eucaryotes - Thèses et écrits académiques
  • Ubiquitines - Thèses et écrits académiques
Résumé : Le génome des cellules est constamment soumis à des agressions exogènes ou endogènes qui créent des lésions sur l'ADN. La synthèse translésionnelle (TLS) permet à la cellule de répliquer l'ADN endommagé grâce à l'intervention d'ADN polymérases spécialisées. En réponse à des agents génotoxiques, le facteur de processivité PCNA, qui interagit avec les ADN polymérases réplicatives et translésionnelles, est mono-ubiquitiné par le complexe Rad6/Rad18. Durant ma thèse, j'ai cherché à (1) comprendre les évènements moléculaires qui déclenchent la mono-ubiquitination de PCNA et (2) à comprendre le rôle de cette modification dans la TLS. (1) Un test in vitro de réplication d'ADN endommagé, dans des extraits cellulaires humains, montre que la mono-ubiquitination de PCNA nécessite une synthèse d'ADN de plus de 40 nucléotides et le blocage au niveau d'une lésion. Cela suggère un processus dynamique au cours duquel le complexe de réplication évolue pour adopter une conformation "mature" nécessaire à l'activation de Rad6/Rad18. (2) L'étude in vitro du franchissement de 2 lésions différentes (TT-CPD et G-AAF) par l'ADN polymérase translésionnelle Pol révèle l'existence d'une voie de TLS indépendante de la mono-ubiquitination de PCNA. De plus, la complémentation de cellules déficientes en Pol par des mutants d'interaction avec PCNA (PIP) et/ou avec l'ubiquitine (UBZ) montre que chacun de ces domaines contribue à l'activité de Pol pour les deux types de lésion. Le domaine UBZ jouerait alors un rôle supplémentaire, non relié à la liaison à l'ubiquitine de PCNA.
 
Type de contenu : Text
 
Entrepôt d'origine : Ressource locale
Identifiant : ecrin-ori-300209
Type de ressource : Thèse