Sondes fluorogéniques pour la détection et l'étude de la dynamique de protéines cellulaires Fluorogenic probes for the detection and the investigation of the cellular protein dynamics transfert d'électron photoinduit reconnaissance spécifique HIS-tag NTA nitrilotriacétate NDA nitrlodiacétate fluorescence click chemistry ; SNAP-tag 572.6 535.3 Chimie click Thèses et écrits académiques Protéines Thèses et écrits académiques Coumarines Thèses et écrits académiques Oxydoréduction Thèses et écrits académiques Fluorescence Thèses et écrits académiques Protéomique Thèses et écrits académiques Sondes fluorescentes Thèses et écrits académiques Microscopie de fluorescence Thèses et écrits académiques Le marquage fluorescent de protéines permet, à travers les techniques de microscopie à fluorescence, d'étudier des mécanismes du vivant au niveau moléculaire. La localisation intracellulaire de protéines par microscopie confocale à fluorescence, ou le suivi en temps réel de l'expression de protéines, exprimés en protéines de fusion avec des protéines autofluorescentes, constituent des pratiques routinières en chimie biologique. Mais malgré la grande quantité d'informations que nous livrent les sondes autofluorescentes, il reste difficile, avec des sondes classiques de visualiser une dynamique moléculaire intracellulaire, comme par exemple l'interaction entre deux protéines, ou bien la diffusion d'une protéine à travers le cytoplasme. Le présent travail de doctorat propose des pistes pour l'élaboration de nouvelles sondes fluorescentes et fluorogéniques à squelette coumarinique, pour l'étude dynamique de protéines cellulaires. Les pistes de développement explorées ont recours à des concepts aussi divers que: La ClickChemistry, le SNAPtag, le transfert d'électrons photoinduit, la reconnaissance entre un HIStag et un motif NTA... Fluorescent protein labeling, and confocal fluorescent microscopy allow us to investigate the mechanisms of life on the molecular level in a non invasive way. Applications, such as the fluorescent localization of proteins in the cytoplasm, or real time monitoring of protein expression, are already well established techniques in the field of chemical biology. Yet, despite all advantages of classical fluorescence labeling techniques, there is still a lack of fluorescence techniques, that allow an insight into the dynamics of proteins. This work discusses a few lines of development which are meant to contribute to the development of such dynamic fluorescent tools. The synthesis and characterization of fluorescent and fluorogenic probes is discussed. Key Concepts: Click Chemistry, SNAPtag, photoinduced electron transfer, recognition between a HIStag and an NTA moiety... Electronic Thesis or Dissertation Text fr France PDF https://publication-theses.unistra.fr/restreint/theses_doctorat/2010/PULITI_David_2010.pdf Université de Strasbourg Strasbourg Puliti David 1980-01-01T00:00:00 FR 161683908 http://www.theses.fr/2010STRA6119 2010STRA6119 2010-09-01T00:00:00 Chimie bioorganique Université de Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Goeldner Maurice 077046595 École doctorale Sciences chimiques (Strasbourg ; 1995-....) ED222 156504081 ddc:530 ddc:570