Développement de tests fonctionnels pour le criblage de l'activité anticorps dans un système microfluidique en gouttelettes
Langue Anglais
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Auteur : Lieber, Diana
Date de soutenance : 30-11-2010
Directeur(s) de thèse : Griffiths, Andrew
Établissement de soutenance : Université de Strasbourg
École doctorale : École doctorale Sciences chimiques (Strasbourg ; 1995-....)
Discipline : Chimie
Classification : Sciences de la vie, biologie, biochimie, Génie chimique, technologies alimentaires
Mots-clés libres : Microfluidique
Mots-clés :
- Microfluidique
- Thèses et écrits académiques
- Criblage pharmacologique
- Thèses et écrits académiques
- Anticorps
- Thèses et écrits académiques
- Hybridomes
- Thèses et écrits académiques
Résumé : Les méthodes de criblage haut-débit sur des cellules nécessitent de petits volumes afin de réduire les coûts et permettre une manipulation rapide des échantillons. En effet, une miniaturisation supplémentaire des technologies classiques de criblage haut-débit en plaques devient problématique à cause de l'évaporation et des forces capillaires. Pour surmonter ces limitations, on a développé des systèmes basés sur la microfluidique en gouttes où des cellules sont cultivées dans des microcompartiments aqueux indépendants entourés d'huile perfluorée inerte. Un tel système permet d'effectuer des analyses automatisées à l'échelle individuelle de chaque compartiment suite à un certain temps d'incubation comme le requiert les tests cellulaires à haut-débit. Nous nous sommes focalisés également sur le développement de tests fonctionnels pour le criblage d'anticorps comme par exemple les anticorps neutralisants le VIH (Virus de l'Immunodéficience Humaine) ou inhibant l'ECA (Enzyme de Conversion de l'Angiotensine). Les approches haut-débit pour la sélection d'anticorps utilisent le phage display ou des hybridomes. Phage display est une méthode efficace mais permet de sélectionner les anticorps pour leur activité de liaison et non pas de neutralisation. Les hybridomes permettent d'effectuer une sélection en fonction de l'activité neutralisante des anticorps, mais dans cette approche on est limité par le nombre de clones pouvant être sélectionnés. Le but de ce projet était d'établir un nouveau test permettant de sélectionner, au niveau de cellules uniques, des cellules sécrétrices d'anticorps (hybridomes). Ce système pourra être utilisé également pour le criblage de cellules B. Une fois établi, ce système pourrait être utilisé pour le criblage/sélection de beaucoup d'autres anticorps thérapeutiques.
Entrepôt d'origine : 
Identifiant : ecrin-ori-304471
Type de ressource : Thèse
