Étude des propriétés biologiques de la protéine p25, de l'ARN3 et de la protéine p14 du Beet necrotic yellow vein virus : vers de nouvelles stratégies de luttes antivirales Study of biological properties of the p25 protein, the RNA3 and p14 protein of Beet necrotic yellow vein virus,towards new strategies for antiviral fights? BNYVV P25 P14 ARN3 modifications post traductionnelles symptômes mouvement à longue distance Pas de mots clés en anglais 572.8 572.6 Betterave à sucre Thèses et écrits académiques Interactions ARN-protéine Thèses et écrits académiques Phytovirus Thèses et écrits académiques Plantes Thèses et écrits académiques Le virus des nervures jaunes et nécrotiques de la betterave (BNYVV) est responsable de la rhizomanie de la betterave sucrière. La prolifération racinaire, les symptômes foliaires et le mouvement à longue distance viral sont liés à l'ARN3 viral. Si l'infection systémique du virus nécessite une séquence nucléotidique de l'ARN3 de 20 nts appelée coremin, les symptômes foliaires et racinaires sont induits par l'expression de la protéine p25. Mes recherches ont été consacrées à l'étude des modifications post traductionnelles de la protéine p25, et plus précisément l'incidence des phosphorylations sur ses propriétés connues, pour rechercher un éventuel mutant dominant négatif utilisable dans la lutte antivirale. Cette étude a montré un rôle de la phosphorylation de la protéine p25 dans la modulation de ses propriétés. J ai recherché les partenaires cellulaires et viraux de la protéine p25 par co-immunoprécipitation et double hybride de levure et montré que la protéine p25 forme un complexe avec les composants de SCF (F-box-Kelch ASK2 Cul1). Nos recherches concernant la séquence coremin de l'ARN3 indispensable pour l'infection systémique chez Beta macrocarpa ont révélé l'interaction spécifique entre cette petite séquence et la protéine p14, le suppresseur de RNA silencing codé par l'ARN2. La protéine p14 et la séquence d'ARN3 sont nécessaires au mouvement à longue distance. Leur interaction favorise mais n apparaît pas essentielle au mouvement viral à longue distance sur B. macrocarpa et Nicotiana benthamiana. La présence de la séquence coremin complémente directement ou indirectement la fonction de la protéine p14 dans l'inhibition de la mort cellulaire et dans la multiplication virale. The Beet necrotic yellow vein virus (BNYVV) is responsible for the rhizomania syndrome of sugar beet. Root proliferation, leaf symptom expression and long distance movement are directly linked to the viral RNA3. If the systemic spread of the virus requires the 20 nts long coremin sequence on the RNA3, the leaf (yellowing) and root (proliferation) symptoms are induced by the expression of the p25 protein. My researches were dedicated to study the post translational modifications of p25 protein, more precisely the incidence of phosphorylations on p25 properties, looking for a possible dominant negative mutant to be used in antiviral fights. This study showed that p25 phosphorylation modulates its properties. I ve searched for cellular and viral partners of the p25 protein using coimmunoprecipitation and yeast two-hybrid and showed that the p25 protein forms a complex with the components of a SCF (F-box-Kelch ASK2 Cul1). Our researches concerning the RNA3 coremin sequence responsible for the systemic spread on Beta macrocarpa, evidenced a specific interaction between this RNA3 sequence and the RNA2- encoded p14 silencing suppressor protein. Both p14 and the coremin sequence are required for viral systemic spread. Their interaction favors but appear not essential for the long distance movement of the virus on B. macrocarpa and Nicotiana benthamiana. The coremin sequence can directly or indirectly complement the p14 function in symptom manifestation and in the viral multiplication. Electronic Thesis or Dissertation Text fr France PDF https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2010/HLEIBIEH_Kamal_2010.pdf Université de Strasbourg Strasbourg Hleibieh Kamal 1978-01-01T00:00:00 FR 136673082 http://www.theses.fr/2010STRA6197 2010STRA6197 2010-12-10T00:00:00 Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie Université de Strasbourg 131056549 Doctorat Docteur es non oui Gilmer David 089486021 École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) ED414 156502844 ddc:570