Nouvelles sondes fluorescentes membranaires pour étudier l'apoptose et l'ordre lipidique
Langue Anglais
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Auteur : Kucherak, Oleksandr
Date de soutenance : 17-05-2011

Directeur(s) de thèse : Mély, Yves

Établissement de soutenance : Université de Strasbourg
École doctorale : École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....)
 
Discipline : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie
Classification : Sciences de la vie, biologie, biochimie, Médecine et santé

Mots-clés libres : fluorescence , membrane probe , membrane surface charge
Mots-clés :
  • Sondes fluorescentes - Thèses et écrits académiques
  • Apoptose - Thèses et écrits académiques
  • Membranes lipidiques - Thèses et écrits académiques
Résumé : La première sonde ratiométrique capable de détecter l'apoptose (F2N12S) a récemment été développée au laboratoire. Le but du présent travail est de développer des sondes fluorescentes pour l'apoptose présentant des caractéristiques améliorées permettant de palier certains défauts de F2N12S. Nous avons découvert que l'apoptose induit non seulement une modification de la charge surfacique du feuillet externe, mais également de son hydratation et de son état de phase, expliquant ainsi la réponse de la sonde. Ensuite, nous avons synthétisé une vingtaine de nouvelles sondes membranaires, qui ont été classées en trois catégories en fonction de leur réponse obtenue sur membranes modèles. Une première catégorie montre une sensibilité presque nulle vis-à-vis de l'état de phase, mais nettement améliorée vis-à-vis de la charge surfacique (>3 fois), comparée à F2N12S. Une seconde catégorie montre une meilleure sensibilité à l'état de phase comme à la charge surfacique. Une troisième catégorie, dérivée du Rouge Nil, est sensible seulement à l'état de phase. En se basant sur ces résultats, nous avons proposé des principes généraux pour la conception de sondes membranaires fluorescentes. Enfin, nous avons décrit deux nouvelles classes de fluorophores sensibles à l'environnement basés sur les résidus fluoréne et 3-methoxychromone afin d'élaborer de nouvelles sondes membranaires. Ces nouveaux fluorophores ont montré des propriétés spectroscopiques intéressantes, telles qu une forte luminosité, une excellente photostabilité et un solvatochromisme exceptionnel. Les premières tentatives pour convertir ces fluorophores en sondes membranaires ont été décrites.
 
Type de contenu : Text
 
Entrepôt d'origine : Ressource locale
Identifiant : ecrin-ori-308377
Type de ressource : Thèse